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    茜素紅S染色液(1%,pH4.2)100ml使用說明書

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    更新時間:2017-07-07 11:36:25瀏覽次數(shù):251次

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    茜素紅S染色液(1%,pH4.2)100ml使用說明書實驗操作步驟:
    1、液的配制:
    六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
    2、陽性對照的設置:
        把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
    3、對于懸浮細胞:
    1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
    2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
    3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
    437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
    5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
    6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
    茜素紅S染色液(1%,pH4.2)100ml使用說明書注意事項
    1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
    2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
    3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
    4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
    5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
    6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
    7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
    CW-2(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

    人正常肺上皮細胞;BEAS-2B

    SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照)

    769-P細胞,人腎癌細胞系(769-P) 中國倉鼠倉鼠肺細胞,R1610細胞 CL-0406NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

    HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞

    hMNC-PB-c single donorultra-pure 外周血來源的人類單核細胞 人髓核細胞HNPC
    CL-0160Molt-4(人急性淋巴母細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

    HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

    人主動脈平滑肌細胞裂解物HASMCL

    SK-HEP-1細胞,人肝癌細胞 人低轉(zhuǎn)移肺癌細胞,95-C細胞 腦動脈血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

    兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1

    TIMP1 Others Human TIMP-1 / TIMP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
    HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

    人結(jié)腸微血管內(nèi)皮細胞HCoMEC

    KMB 人胚肺成纖維樣細胞

    CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

    GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

    人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
    大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    人細胞纖維連接蛋白(cFn)免疫試劑盒 Human cellular fibronectin,cFn ELISA kit

    (CAT)測試盒 可見分光光度法 50/48

    Ratnitricoxidesynthase,NOSELISA試劑盒大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    HumanHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    The rat gastric cancer marker CA199ELISA Kit 大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒

    HumanCystatinC,Cys-CELISAKit 人半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

    HumanComplement1inhibitorautoantibody,C1INHELISA試劑盒人補體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    組織AX1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

    Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    茜素紅S染色液(1%,pH4.2)100ml使用說明書人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    人淋巴細胞功能相關抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

     

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