蘇木素伊紅染色試劑盒200ml實驗方法 返回列表頁

蘇木素伊紅染色試劑盒200ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
蘇木素伊紅染色試劑盒200ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

非洲綠猴腎細胞;VERO

VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細胞裂解液 (陽性對照)

RKO細胞，人結腸癌細胞 人皮膚黑色素瘤細胞,SK-MEL-1細胞 人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF

ANPEP Others Human 人 ANPEP / CD13 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0087H4(人腦神經膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2

IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠直腸平滑肌細胞*培養基 100mL

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養基+5%FBS

CNTF Protein Rat 重組大鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白

SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2 K562(慢性髓原白血病)
CD22 Others Human 人 Siglec-2 / CD22 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細胞-淺色素HEM-l

L Wnt-3A 小鼠皮下結締組織細胞

CM-H067人腎系膜細胞*培養基100mL

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞

人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1 人視網膜muller細胞*培養基 100mL
大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 ，英文名： sEPCR ELISA Kit

人血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA檢測試劑盒HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1ELISAkit 96T/48T

三聚氰胺ELISA快速檢測試劑盒 Melamine ELISA Kit

CLIAKitforOPG(HumanOsteoprotegerin)ELISAKIT人骨保護素規格：48T/96T

糖化血清白蛋白(GSP)化學比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitAO人吖啶橙規格：48T/96T
小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Tacrolimus (FK506) ELISA Kit 人*(FK506)ELISA試劑盒

HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人單純皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISA試劑盒人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA試劑盒規格：96T/48T

植物源性食品芥麥(Buckwheat)基因檢測試劑盒20次

Humanthymusactivationregulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規格：96T/48T
蘇木素伊紅染色試劑盒200ml實驗方法兔素(Renin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔神經生長因子（NGF）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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