轉膜液（Western）,PVDF膜適用50ml實驗方法 返回列表頁

轉膜液（Western）,PVDF膜適用50ml實驗方法儲存條件：室溫保存。

有效期：一年。

產品簡介：

Western轉膜液試劑用于Western時濕法電轉膜。本試劑不使用有毒的甲醇試劑以及其他有毒性組分，轉膜液安全無毒。加水后直接配制，無需調節PH值。轉膜液可以回收使用。

轉膜液（Western）,PVDF膜適用50ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
轉膜液（Western）,PVDF膜適用50ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
蘿藦科牛奶菜屬植物* Marsdeniatenacissima(Roxb.)WightetArn. Tenacissoside I *苷I 191729-44-9 C44H62O14 ≥98%

葉皇速Xcnthophyll17-40-20mg

羅漢果皂苷V;羅漢果皂苷V;羅漢果甜苷V Mogroside Ⅴ 88901-36-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品地*130516-200401含量測定

新苦參醇 Neokurarinol 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
27631-29-4 多沙唑嗪相關雜質E標準品 20mg

割舌樹Walsura robusta 南美楝屬二醇 67253-01-4 C30H52O3 ≥99% 流柳;鄰乙流基本酸鈉(Y0000109

2,4-TDI Derivat 癸二酸二丁酯標準 已二酸二異丁酯標

*雜質B標準品103577-40-8 ea*雜質B標準品

斯皮諾素 72063-39-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
18559-94-9 *標準品 200mg

野馬追內酯BEupatoriumlindleyanumlactonepHPLC≥98%;20mg/支

O-Demetxylforbexanthone 7,9,12-三輕基-2,2-二甲基-2H,6H-并[3,2-B]氧雜意-6-同 92609-77-3

烯蟲酯 標準品 號：40596-69-8 100mg

(無水)葡萄糖;純品型;標準品;有證書 50-99-7 1g 訂購|咨詢
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人特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒 Human Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit

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IGF-II(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

HumanNephrinELISA試劑盒人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

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