BCIP/NBT顯色試劑盒50ml使用說明書 返回列表頁

BCIP/NBT顯色試劑盒50ml使用說明書儲存條件：2-8℃避光保存。

有效期：一年

產品簡介：

BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP會被水解產生強反應性的產物，該產物會和NBT發生反應，形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。本試劑盒可以用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定，也可以用于Western等結合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測。

BCIP/NBT顯色試劑盒50ml使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
BCIP/NBT顯色試劑盒50ml使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
鳶尾 Iris tectorum Maxim. Tectorigenin 鳶尾黃素 548-77-6 C16H12O6 ≥98%

野馬追內酯Aqupctoriumlindlqycnumlcctonqc8778-41-810mg

魯斯可皂苷元;魯斯考皂苷元 Ruscogenin 472-11-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*酯130512-200201含量測定

補骨脂二氫黃酮甲醚;甲基補骨脂黃酮A;補骨脂雙氫黃酮甲醚 Bavachinin A 19879-30-2 20mg HP
27194-74-7 丙二醇單月桂酸酯I型標準品 500mg

六棱菊Laggera alata 2,6-二甲氧基-1-乙酰甲基輕醌 2215-96-5 C11H14O5 ≥95% 黑升甙0 62

阿斯巴甜相關物質A標準品122822225mg

metxylprednisolone Acetate *醋酸酯標準品53-36-1 200mg*醋酸酯標準品

朝藿定B 110623-73-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
馬鞭草Herba Verbenae Verbenalin 馬鞭草苷 548-37-8 C17H24O10 ≥98%

葉醋Folicccid29-30-320mg

人參皂苷CK;人參皂甙CK Compound CK 39262-14-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*140631-200302檢查

比枯枯靈;畢靈(堿)，荷包牡丹堿;山烏龜堿 Bicuculline 485-49-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠成纖維細胞生長因子12(FGF12)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF12 ELISA Kit

人天青殺素(AZU)ELISA檢測試劑盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)免疫試劑盒 Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit

英文名稱RatTestoteroneELISAKit大鼠睪同(Testoterone)ELISAKit規格：96T/48T

酵母細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

ELISAKitDAF/CD55人衰變加速因子規格：48T/96T
兔子白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒

HumanpodocinELISAKit 人PodocinELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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組織TAK1-TAB1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

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