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酵母核蛋白提取試劑盒100T免費代測儲存條件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產品簡介:
酵母核蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種酵母中提取核蛋白。提取過程簡單方便。制備的核蛋白純度高,保持天然活性,絕少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
酵母核蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
酵母核蛋白提取試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
烏頭屬歐烏頭、川烏、北草烏和 華烏頭Aconitum Talatisamine 塔拉薩敏 20501-56-8 C24H39NO5 ≥98%
β-葡聚糖酶Gluccncsq5g
*次減 wilforine 11088-09-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
IR鑒別酸吡哆醛丁地爾100854-200701常溫,避光100mg
巴利森苷C Parishin C 174972-80-6 20mg HPLC≥98% 巴利森苷C 174972-80-6用于含...
25389-94-0 流*標準品 200mg
甜菜減;甘安醋三胺內鹽Glycinepetaine;trimetxylamineinnersalt107-43-7HPLC≥98%,20mg/支
Oxychelerythrine 氧基屈菜季銨減 28342-33-8
Levalbuterol xy7nochloride 左*鹽酸鹽標準品50293-90-8 200mg
7-羥基-5,8-二甲氧基黃烷酮 54377-24-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
NA *相關化合物F標準品(NA) 20mg
一文錢Stephania delavayi 克班寧 25127-29-1 C20H21NO4 ≥95% 肖本地平 雜質A(N0750010
言酸金每素標準品 言酸*標準 錄青典柳安標準品
Polyetxylene Glycol 3000聚乙二醇3000標準品25322-68-3 1g聚乙二醇3000標準品
漆黃素 528-48-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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