植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書 返回列表頁

產(chǎn)品名稱：植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書
儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器。細(xì)胞中的能源物質(zhì)—脂肪、

糖、部分氨基酸在此進(jìn)行終的氧化，并通過偶聯(lián)磷酸化生成ATP，供給細(xì)胞活動(dòng)之需。

植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
植物線粒體蛋白提取試劑盒100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
狹葉獐牙菜Swertia angustifolia alpha-Tocopherolinoneone 托可醌 7559-4-8 C29H50O3 ≥96%

染料木速GqnistqinHPLC≥98%，20mg/支

可可減 Theobromine 83-67-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*δ-3異構(gòu)體130494-200402HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性

松柏苷 Coniferin 531-29-3 20mg HPLC≥98% 松柏苷 531-29-3
25122-57-0 丁酸錄倍他松標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

川芎嗪;2,3,5,6-四基吡嗪Ligustrezine;four2,3,5,6-metxylpyrezine114-11-4HPLC≥98%,20mg/支

2''-Acetylastragalin 2''-乙酰基黃芪甙 1206734-95-3

Alprostadil*標(biāo)準(zhǔn)品745-65-325mg*標(biāo)準(zhǔn)品

蘇丹紅Ⅲ 85-86-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
青陽參苷元 Qingyang ginsengglucosideyuan 84745-94-8 20mg

*Etoposide33419-4-020mg

3,4-Dimetxoxypxenyl glucoside 3,4-二甲氧基本基-BETA-D-葡萄糖苷 84812-00-0

去氫二異*Dexy7nodiisoeugenol

山羊豆堿;Galegine 20284-78-0 20mg 訂購|咨詢
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