細菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書 返回列表頁

產品名稱：細菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書
儲存條件：蛋白提取液A室溫保存；蛋白提取液B和蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

細菌總蛋白提取試劑盒（雙向電泳用）可以從各種原核細菌樣本中提取總蛋白，提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了。提取的蛋白用于雙向電泳。

細菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
細菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細菌總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
黃芩Scularia baicalesis 2',5,6',7-Tetraxy7noxyflavanone none 80604-16-6 C15H12O6 ≥98%

異甘草苷IsoliquiritinHPLC≥98%，20mg/支

甲基蓮心減 Neferine 2292-16-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定磺酸* 100829-200501常溫，避光100mg

氧化白藜蘆醇 4-[2-(3,5-dixy7noxypxenyl)ethenyl]benzene-1,3-d
2390-9-1 二十碳烯酸甲酯(順-11)(C20:1)標準品(-20℃)(N/... 100mg

番石榴Psidium guajava none 1411629-26-9 C30H34O5 ≥95% 漠索泥定(Y0000226

Baicalein黃芩素491-67-8*元; 黃芩黃素20mg/支

三乙醇胺標準品102-71-6 3ml

馬兜鈴 Aristolochia debilis Sieb.et Zucc. Aristolochic acid A 馬兜鈴酸 A 313-67-7 C17H11N
異丙醇 Isopropyl alcohol 1ml

異鉤藤減Isorhynchophyllinq6829-1-4HPLC≥98%;20mg/vial

雞屎藤苷酸 paederosidic acid 18842-98-3 0.98 10mg/支

含量測定左氧扶沙星130455-2010052-8℃，避光100mg

千金藤素;千金藤堿;頭花千金藤堿;千金藤啶堿 Cepharanthine 481-49-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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