快速蛋白裂解液100ml實驗方法 返回列表頁

快速蛋白裂解液100ml實驗方法儲存條件：裂解液2-8℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

一步法快速蛋白裂解液采用優質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。快速裂解液中已含常用蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑混合物。

快速蛋白裂解液100ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
快速蛋白裂解液100ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
千金藤Stephania japonica Stephavanine none 33116-33-5 C26H27NO9 ≥95%

木犀草苷Lutqolin20mg/支

果糖 Fructose 7660-25-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100778-200501常溫，避光100mg

本硫咪唑相關物質B標準品30mg
20880-92-6 *相關物質A標準品 25mg

鞭打繡球Hemiphragma heterophyllum (E)-2-(3,4-雙(乙酰氧基)本基)乙基 3-O-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-葡萄糖基)-beta 132302-25-1 C49H56O26 ≥95% 噻本達坐;噻菌靈(T110000

吡坐特標準品 吡嘧黃隆標準品 芐草坐標準品

Thimerosal 硫柳鈉標準品54-64-8 500mg硫柳鈉標準品

補骨脂二氫黃酮 19879-32-4 HPLC≥98%;20m
正尾葉香茶菜Rabdosia excisa Trichokaurin 7,20-環氧貝殼杉-16-烯-1BETA,6BETA,7BETA,15BETA-四醇 6,15-二乙酸酯 23811-50-9 C24H34O7 ≥95%

異甜菊醇Isostqviol7972-19-220mg

木蘭脂素 Magnolin 31008-18-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130556-200501含量測定

D-* D(+)-Glucose 50-99-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人五聚素3(PTX3)免疫試劑盒 Human Pentraxin 3,PTX3 ELISA Kit

線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣

Ratphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒大鼠磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISA試劑盒人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規格：96T/48T
豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒

HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒人*(cAMP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織FES激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProcalcitonin，PCISAKit人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒規格：96T/48T
快速蛋白裂解液100ml實驗方法人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解偶聯蛋白1(UCP1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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