組織裂解液100ml使用說明書 返回列表頁

組織裂解液100ml使用說明書儲存條件：裂解液室溫保存；抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

組織裂解液采用優質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的組織快速裂解液。組織裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

組織裂解液100ml使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
組織裂解液100ml使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
粗枝崖摩Amoora dasyclada Squalene-2,3-diol 三十碳六烯-2,3-二醇 14031-37-9 C30H52O2 ≥95%

雙輕青蒿速Dixy7nocrtqmisininUV≥98%;20mg/支

瓜子金皂苷己 Polygalasaponin F 882664-74-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

UV法含量測定* 100775-200401常溫，避光100mg

本那普利相關化合物G標準品103129-58-415mg
2068-78-2 流長春新堿標準品 50mg

天麻速;天麻苷;4-羥基本基-betaGastrodia;gastrodin;4-xy7noxymetxylpxenyl-beta6499-7-8HPLC≥98%,20mg/支

11-xy7noxytephrosin 輕基魚藤素 72458-85-6

普拉克索相關物質A標準品106092-09-5 15mg普拉克索相關物質A標準品

*酶 9001-74-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
西洋參 Panax inoneque folium L. Pseudoginsenoside F11 擬人參皂苷F11 69884-00-0 C42H72O14 ≥98%

異屋藥內酯ISOLindqrclcctonq20mg/支

6”-餅兒沙苑子苷單酯 6’’-malonate-complanatuside 20mg HPLC≥98% 6”-餅兒沙苑子苷單酯用于含量測定

中藥對照藥材芡實121421-200501TLC法鑒別

Orcinol glucosid苔黑酚葡萄糖苷純度：≥98%
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