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細胞核蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產品名稱：細胞核蛋白提取試劑盒100T實驗方法
產品簡介：

核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種原代或傳代細胞中提取核蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。制備的核蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

細胞核蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞核蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
白屈菜 Chelidonium majus L. Sanguinarine 血根堿 2447-54-3 C20H14NO4+ ≥98%

高三尖杉酯減HomohcrringtoninqHPLC≥98%,20mg/支

茶減 Theophylline 58-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定鹽酸布替奈芬100681-200501常溫，避光100mg

Ibuprofen *標準品15687-27-1 750mg
160337-95-1 *標準品(NA) 15mg

高麗槐速;馬卡因GaoLihuai;maackiain19908-48-6HPLC≥98%,20mg/支

LaMiide LAMIIDE 27856-54-8

噻嘧啶相關物質A標準品25mg噻嘧啶相關物質A標準品

5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸 117570-53-3 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
黃連堿 Coptisine (≥98%,HPLC) 3486-66-6 20MG 標準品

余甘子Phyllanthus emblica 算盤子二醇 6610-56-6 C30H50O2 ≥97.5% 胡黃連苦甙 I168195

Sesamin芝麻素607-80-720mg/支

Oxymetxolone CIII羥甲稀龍標準品434-07-1 200mg

長春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine 長春質堿 2468-21-5 C21H24N2O2 ≥98%
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