活性蛋白提取試劑盒50T使用說明書 返回列表頁

活性蛋白提取試劑盒50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：活性蛋白提取試劑盒50T使用說明書
產(chǎn)品簡介：

活性蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了。

活性蛋白提取試劑盒50T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活性蛋白提取試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
柴胡 Bupleurum chinense DC. Saikosaponin D 柴胡皂苷D 20874-52-6 C42H68O13 ≥98%

果糖Fructosq20mg/支;

表沒食子兒茶速沒食子酸酯 Epigallocatechin gallate;EGCG 989-51-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定* 100670-200401常溫，避光100mg

殘留溶劑第2類混合物C標(biāo)準(zhǔn)品1.2ml×3ampules
154361-51-0 典普羅胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

杜虹花Callicarpa pedunculata 4'-O-反式對香豆酰玉葉金花甙酸甲酯 1246012-27-0 C26H32O12 ≥95% 流酸多粘菌素 B(P200000

1，3-丙二醇標(biāo)準(zhǔn) 1，4-本二安標(biāo)準(zhǔn) 2-(鄰)本基本酚標(biāo)

Procyclidine xy7nochloride鹽酸丙環(huán)定標(biāo)準(zhǔn)品1508-76-5 200mg

輕臭東莨菪堿 114-49-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蕨Pteridium aquilinum var. latiusculum p-Vinylpxenyl O-[beta-D-apiofuranosyl- (1-6)]-beta-D-glucopyranoside BETA-D-對基本基 6-O-芹糖-BETA-D-呋喃糖基-BETA-D-葡萄糖苷 112047-91-3 C19H26O10 ≥95%

羽扇豆醇Lupqol242-47-120mg

輕溴酸東莨菪減;東莨菪減輕溴酸鹽 Scopolamine xy7nobromide 114-49-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標(biāo)準(zhǔn)品降纖酶140620-200301效價(jià)測定

白頭翁皂苷A3;白頭翁皂甙A3 Anemoside A3 9724-84-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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