膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒50T售后服務 返回列表頁

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膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒50T售后服務產品簡介：

膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等哺乳動物組織中分步提取膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。

膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒50T售后服務實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒50T售后服務注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
豆科(Legumin0sae) 植物合歡的干燥樹皮 (-)-Syringaresnol-4-O-beta-D-apiofuranosyl -(1→2)-beta-D-glucopyranoside (-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷 136997-64-3 C33H44O17 ≥98%

異葒草苷Isooriqntin20mg/支

貝母素乙;貝母乙素 Peiminine 18059-10-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定* 10066
151767-02-1 *標準品 50mg

槐角減Sophorajaponicabase7881-0-4HPLC≥98%,20mg/支

7,3',4'-Trixy7noxyflavone 3',4',7-三輕基黃同 2150-11-0

硝羥本胂酸 標準品 號：121-19-7 250mg

甲基*查爾酮 24292-52-2 HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
甘草苷 Liquiritin 551-15-5 20mg

愈創木酚Guaiacol399420mg

7α-xy7noxystigMasterol 7ALPHA-輕基豆甾醇 64998-19-2

Iso異標準品3344-12-550mg異標準品

水合氧化前胡素;Oxypeucedani 2643-85-8 20mg 訂購|咨詢
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