膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法 返回列表頁

膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法黃連 Chinese goldthread (-)-Stulopine 四氫黃連堿 4312-32-7 C19H17NO4 ≥98%

紫云英苷cstrcgclinHPLC≥98%;20mg/支

貝母素甲;貝母甲素 Peimine 23496-41-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材龜甲(腹甲)121494-200401TLC法鑒別

STIGMASTEROL 豆甾醇純度：>95%

產(chǎn)品名稱：膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動(dòng)物組織中分步提取膜蛋白/胞漿蛋白/核蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。

膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
膜/胞漿/核蛋白分步提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
151767-02-1 *標(biāo)準(zhǔn)品 150mg

葫蘆巴減鹽醋鹽;鹽醋葫蘆巴減Trigonellinexy7nochloride;trigonellinexy7nochloride6138-41-6HPLC≥98%,20mg/支

(+)-Puerol B 2"-O-glucoside (5R)-4-[2-(BETA-D-葡萄糖基氧基)-4-甲氧基本基]-5-[(4-輕基本基)甲基]-2(5H)-呋喃同 868409-19-2

Lactic Acid 乳酸標(biāo)準(zhǔn)品50-21-5 1.5ml×3ampule
遠(yuǎn)志 Polygala tenuifolia Willd. Tenuifolin 細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷 20183-47-5 C36H56O12 ≥98%

愈創(chuàng)木酚Guciccol1990-2-120mg

*;四輕巴馬汀;延胡索乙素 Rotundine 10097-84-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定*100870-200801常溫，避光100mg

新苦參酮 Norkurarinone 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠血管細(xì)胞粘附分子(VCAM-1)ELISA試劑盒 ，英文名： VCAM-1 ELISA Kit

人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAdenovirusIgM,ADV-IgMELISAKit 96T/48T

大鼠F-肌動(dòng)蛋白免疫試劑盒 Rat F-actin ELISA Kit

CLIAKitforSLPI(Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor)ELISAKit人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子規(guī)格：48T/96T

軟組織固著液(Bouin固著液)50毫升

ELISAKitbFGF-9人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9規(guī)格：48T/96T
小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat leptin (LEP) ELISA Kit 大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒

HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit 人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCholicacid,CAELISA試劑盒人膽酸(CA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

總L-高半*(Hcy)定量檢測(cè)試劑盒50次

Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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