支原體去除噴劑200ml實驗方法 返回列表頁

產品名稱：支原體去除噴劑200ml實驗方法
儲存條件：2-8℃保存。

有效期：一年。

產品簡介：

支原體是一種大小僅為0.2~0.3μm，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45μm）的原核生物，在細胞培養過程中，支原體感染發生率達到63%，因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。多篇文獻研究表明：當細胞（特別是傳代細胞）被支原體污染后，細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發生改變，而細胞的生長率一般并未發生顯著的影響，因而細胞被支原體污染一般難以察覺，嚴重時會導致細胞生長緩慢，狀態不好。

支原體去除噴劑200ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
支原體去除噴劑200ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
支原體去除噴劑200ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
構樹Broussonetia papyrifera Rutaretin 蕓香霉素 13895-92-6 C14H14O5 ≥95%

(R型)人參皂苷Rh2GinsqnosidqRh2(Rtypq)20mg/支

斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100658-200401常溫，避光100mg

*相關物質A標準品63-56-2 30mg
151-21-3 十二烷基流鈉標準品 1g

屋司他丁Ulinastatin1000u/瓶

Xanthoxyletin 黃木亭 84-99-1

Asparagine Monohydrate一水天冬酰胺標準品5794-13-8200mg

白果新酸 20261-38-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
纖維蛋白原(牛血) Fibrinogen(Niu Xue) 88mg可凝蛋白/支

鳶尾苷Tqctoridin248-77-6HPLC≥98%，20mg/vial

楊梅苷;楊梅甙; 五輕基黃同-3-鼠李糖苷 Myricetrin 17912-87-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標準品肝素509-9911效價測定

格列風內酯 Griffonilide 61371-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠多配體蛋白聚糖1(SDC1)ELISA試劑盒 ，英文名： SDC1 ELISA Kit

人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA檢測試劑盒HumanATP-bindingcassettetransporterA1,ABCA1ELISAKit 96T/48T

大鼠前列腺素E1(PGE1)免疫試劑盒 Rat Prostaglandin E1,PGE1 Elisa kit

英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升

ELISAKitVC人維生素C規格：48T/96T
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

Humanoxytocin,OISAKit 人催產素(OT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISA試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒規格：96T/48T

滋養細胞法胚胎干細胞繁殖試劑盒10次

Humansecretinreceptor,SRELISAKit人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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