DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務(wù) 返回列表頁

DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務(wù)注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務(wù)儲存條件： -20℃避光保存。

有效期： 六個月。

產(chǎn)品簡介：

活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等，參與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多和病理過程。

DHE活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DHE(Dihydroethidium)進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。DHE可自由透過活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的ROS氧化，形成氧化乙啶；氧化乙啶可摻入染色體DNA中，產(chǎn)生紅色熒光。根據(jù)活細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞ROS含量的多少和變化。二氫乙啶在細(xì)胞內(nèi)主要被超氧陰離子型ROS氧化，用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種快速簡便的組織或培養(yǎng)活細(xì)胞中ROS經(jīng)典檢測方法。 在激發(fā)波長535nm，發(fā)射波長610 nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測熒光，從而測定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。

DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務(wù)實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
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石斛酚;石槲酚 Dendropxenol 108853-14-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定丁本酞101035-200901常溫，避光500mg

*;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二氫黃酮甙;*;二氫黃酮苷 Hesperidin 520-26-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
細(xì)胞凋亡測試盒(TdT酶、稀釋液、POD)50支/包RT

9016-87-9聚(本基)-聯(lián)-甲醛Polymetxylene polypxenyl polyisocyanate

2-(pyridin-2-yl)pxenol 33421-36-2

(1R,2R)-二[(2-甲氧... (R,R)-DIPAMP,≥95% 55739-58-7 50MG 表面活性劑

4-基酚shēng huà shì jì容量：500毫克
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))shēng huà shì jì容量：25克

611-19-8鄰錄錄芐2-Chloropenzyl xloni7e

鄰啰啉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃150ku

間苯甲酰 3-Chlorobenzoyl chloride,≥97.0% 618-46-2 25G 通用試劑

補骨脂素 Psoralen (≥98%,HPLC) 66-97-7 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務(wù)γ-人球蛋白/人丙種球蛋白/普通丙種球蛋白/human γ-globulin BR，96- 250毫克 國產(chǎn)/進(jìn)口

Chitinase殼多糖酶25克BR，5u/ul，99%

鉑;柏金;鉑黑 PlctinuM 7440-6-4

一水肌酸/肌酸/N-甲基胍基乙酸/胍基醋酸/肌肉素/肌基酸/甲胍基醋酸/Creatine Monohydrate BR，99%， 100克 國產(chǎn)/進(jìn)口

二胺氧化酶測試盒/DAO測試盒 比色法 25毫升 國產(chǎn)