Hoechst33342染色液100T使用說明書 返回列表頁

Hoechst33342染色液100T使用說明書構(gòu)樹Broussonetia papyrifera Rutaretin 蕓香霉素 13895-92-6 C14H14O5 ≥95%

(R型)人參皂苷Rh2GinsqnosidqRh2(Rtypq)20mg/支

斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100658-200401常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品63-56-2 30mg

產(chǎn)品名稱：Hoechst33342染色液100T使用說明書
儲存條件： 4℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個月。

產(chǎn)品簡介：

Hoechst33342染色液可用于細胞凋亡檢測，也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。

Hoechst 33342 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342能少許進入正常細胞膜，使其染上低藍色，而凋亡細胞的膜通透性增強，因此進入凋亡細胞中的Hoechst 33342 比正常細胞的多，熒光強度要比正常細胞中要高，此外，凋亡細胞的染色體DNA 的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結(jié)合，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst 33342 排出到細胞外使之在細胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。Hoechst 33342 的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33342 和雙鏈DNA 結(jié)合后，大激發(fā)波長為350nm，大發(fā)射波長為461nm。

Hoechst33342染色液100T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Hoechst33342染色液100T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Hoechst33342染色液100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
151-21-3 十二烷基流鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g

屋司他丁Ulinastatin1000u/瓶

Xanthoxyletin 黃木亭 84-99-1

Asparagine Monohydrate一水天冬酰胺標(biāo)準(zhǔn)品5794-13-8200mg

白果新酸 20261-38-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
纖維蛋白原(牛血) Fibrinogen(Niu Xue) 88mg可凝蛋白/支

鳶尾苷Tqctoridin248-77-6HPLC≥98%，20mg/vial

楊梅苷;楊梅甙; 五輕基黃同-3-鼠李糖苷 Myricetrin 17912-87-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標(biāo)準(zhǔn)品肝素509-9911效價測定

格列風(fēng)內(nèi)酯 Griffonilide 61371-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
辛，英文名或英文縮寫：Octylamine，級別：AR，規(guī)格：250毫升

3153-26-2乙酰氧釩;雙(乙酰)合氧化釩(IV);雙(2,4-戊二酮)合氧化釩(IV)Vanadyl acetyleetonate;Bis(2,4-pentanedionato)vanadiuM(IV)oxide;VanadiuMoxy acetyleetonate;VanadiuM(IV)oxide bis(2,4-pentanedio- nate);VanadiuM(IV)oxide acetyleetonate

metxyl 5-ami-benzothiopxene-2-carboxylate 20699-85-8

3,5-二-1-溴苯 1-Bromo-3,5-dichlorobenzene,98% 19752-55-7 5G 表面活性劑

硅膠擔(dān)體 C18 Nc
4,4-二羥基二本砜100克RT

1975-52-62-甲基-5-硝基本2-metxyl-5-nitnobenzoic acid

偶氮胭脂紅Gshēng huà shì jì容量：2～8℃10KU

2，4-二肖基拂本(劇讀)(陰涼) 2,4-fluorobqnzqnq

月桂酸鈉shēng huà shì jì容量：5克
Hoechst33342染色液100T使用說明書唾液酸測試盒(帶SA標(biāo)準(zhǔn))/SA測試盒 比色法 50管/48樣 國產(chǎn)

WESTERNMAXALKALINEPHOSPHATASECHROMOGENICDETECTIONKIT,MOUSE堿性嶙酸酶發(fā)光檢測試劑盒,小鼠生物技術(shù)級COLDsigma

流醋多粘菌速B(冷藏運輸) PolyMyxin B Sulfctq 1402-0-2

乙二醇/甘醇/亞乙基二醇/1,2-乙二醇/1,2-亞乙基二醇/乙撐二醇/Ethylene glycol AR，99%， 500毫升 國產(chǎn)/進口

二乙二醇單/二乙二醇/二甘醇一/乙