DAPI染色液100T實驗方法 返回列表頁

產品名稱：DAPI染色液100T實驗方法
儲存條件： 2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個月。

產品簡介：

DAPI染色液可用于細胞凋亡檢測，也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。DAPI(diamidino-2-phenylindole)能與雙鏈DNA小槽，特別是AT堿基結合，也可插入少于3個連續AT堿基對的DNA序列中。當它與雙鏈DNA結合時，熒光強度增強20倍，而與單鏈DNA結合則無熒光增強現象，因此是一種簡易、快速和敏感地檢測DNA的方法。DAPI的熒光強度較Hoechst低，但熒光穩定性優于Hoechst；其特異性較溴化乙啶和碘化丙啶高。

DAPI染色液100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
DAPI染色液100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
DAPI染色液100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
吳茱萸Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth. Rutaecarpine 吳茱萸次堿 84-26-4 C18H13N3O ≥98%

白花前胡炳速WhiticnHuBingsuHPLC≥98%;20mg/支

楊素;5,7-二輕基黃同; 柯應; 5,7-楊黃素; 金黃同 Chrysin 480-40-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100657-200401常溫，避光100mg

*相關物質B標準品4880-92-6 30mg
1508-65-2 錄化奧昔布寧標準品 200mg

秋水仙減;秋水仙速Colchicine;ColchicineColchicineHPLC≥98%,20mg/支

p-CouMaryl alcohol 對輕基肉桂醇 653915

potewwium Gluconate 葡萄糖酸鉀標準品299-27-4 200mg葡萄糖酸鉀標準品

派利文堿 2673-40-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*雜質B標準品 1.15ml

鳶尾皇速Tectorigenin248-77-6HPLC≥98%,20mg/支

StigMasta-4,22-diene-3β,6β-diol 豆甾-4,22-二烯-3BETA,6BETA-二醇 167958-89-6

Oxybenzone 羥本甲酮標準品131-57-7 150mg羥本甲酮標準品

鯊肌醇 488-59-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
辛基本基聚氧醚，英文名或英文縮寫：Triton x-100，級別：BR，規格：1克

83-56-71,5-二羥基;1,5-二酚1,5-Dixy7noxy

Bromothymolbluewo7iumsalt溴百里香酚藍鈉1克高純，98%

2-本酰安 2-Phqnylccqtcmidq 103-81-1

Benzenesulfinicacidwo7iumsalt本亞磺酸鈉500ul*100支高純，99%
4,4-二羥基-6-[10-羥基-6-羰基十一烷基]本酸內酯，英文名或英文縮寫：Zearalanone，級別：分析標準品，90%，規格：1克

13464-38-5三鈉triwo7ium arsenate

蘇旦I，英文名或英文縮寫：Sudan I，級別：BR，99%，規格：1公斤

1-溴-3,5-二苯 1-Bromo-3,5-difluorobenzene,98% 461-96-1 5G 通用試劑

聚乙二醇200/聚氧200/PEG200 CP 500克 國產/進口
DAPI染色液100T實驗方法精酸葡萄糖斜面瓊脂100毫升2～8℃

鷹爪豆堿(+4℃)(-)-Sparteine sulfate pentahydrate

曲拉通x-1001毫升

乙二醇苯醚 2-Phenoxyethanol,99% 122-99-6 500G 通用試劑

培養皿刷/Petri dish brush ￠60mm 10支/把 國產/進口