尼氏染色試劑盒（*法）3×50ml實驗方法 返回列表頁

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尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法產品簡介：

神經元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒，既能夠代表粗面內質網并再很多神經元中產生特意的斑點狀嗜堿性表現的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質，也可以顯示神經元的細胞核和神經膠質。尼氏體（Nissl body）或稱尼氏小體是分布于神經細胞質內的三角形或橢圓形小塊狀物質，能被堿性染料如硫堇、*、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。

尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
尼氏染色試劑盒(*法)3×50ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
旱冬瓜Alnus nepalensis Rubranol (R)-1,7-雙-(3,4-二羥基本基)-5-羥基庚烷 211126-61-3 C19H24O5 ≥98%

香蒲新苷TyphcnqosidqHPLC≥98%，20mg/支

頭翁皂苷A3;頭翁皂甙A3 Anemoside A3 9724-84-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材牡丹皮121490-200501TLC法鑒別

GYMNEMAGENIN 匙羹藤新苷元純度：>95%
149845-06-7 甲磺酸沙奎拉韋標準品 200mg

奧沙西半oxezepem50mg

Acantrifoic acid A 654663-85-1

乙醇測定用內標對照溶液標準品(乙睛水溶液)1975-5-85mlX5ampules

半枝蓮堿 176520-13-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
56211-40-6 *標準品 200mg

原啊片減Protopine130-86-9HPLC≥98%,20mg/支

Helichrysetin 4,2',4'-三輕基-6'-甲氧基查耳同 62014-87-3

抑草生 標準品 號：132-66-1 100MG

藜蘆醇 1993-3-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
辛基*基錄化，英文名或英文縮寫：Octyltrimetxylammonium chloride，級別：BS，規格：5克

酪安醋酶(-20℃) TYROSINcSq 900-10-

4-pxenylthiopxene-2-carboxaldehyde 26170-87-6

2-苯基環戊酮 2-Chlorophenyl cyclopentyl Ketone,98% 6740-85-8 5G 通用試劑

乳酸測試盒(測全血)/LD測試盒(測全血) 可見光比色法 50管/48樣 國產
4,4'-Bipyridineγ,γ-聯1克AR，99%

10034-82-9wo7ium chromate tetrahydrate

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