CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法 返回列表頁

我司CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！

CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法儲存條件： 2-8℃避光保存。*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒CellCountingKit-8(CCK-8)是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中，不需要預(yù)配各種成分，CCK-8溶液很穩(wěn)定，對細(xì)胞沒有毒性，可以長時間孵育細(xì)胞。CCK-8法測定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的靈敏度高，無放射性，檢測細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它方法如MTT,XTT,MTS和WST-1高。

CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法注意事項
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
大黃 Rheum palmatum L. Rhein 大黃酸 478-43-3 C15H8O6 ≥98%

蘆薈苷Thqcloqglucosidq20mg/支

α-亞酸 α-Linolenic acid 463-40-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材朱砂根121470-200401TLC法鑒別

Raddeanin(Anemodeanin) A竹葉香附素A純度：98%
144-55-8 *標(biāo)準(zhǔn)品 3g

寶藿苷IEnergy-savingI113228-12-9HPLC≥98%,20mg/支

metxyl 2-(5-acetyl-2,3- dixy7nobenzofuran-2-yl)propenoate 2-(5-乙酰基-2,3-二輕本并呋喃-2-基)丙烯酸甲酯 617722-55-1

Tyloxapol 四丁酚醇標(biāo)準(zhǔn)品25301-02-4 600mg四丁酚醇標(biāo)準(zhǔn)品

4-beta-羥基* 17320-10-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
葡萄糖純度標(biāo)準(zhǔn)品 2g

原蘇木速B;原巴西蘇木速ProtosappaninB;originalBrazilhematoxylin10036-9-3HPLC≥98%,10mg/支

Honyucitrin HONYUCITRIN 114542-44-8

Somatropin人生長激素標(biāo)準(zhǔn)品12629-01-5 1 vial人生長激素標(biāo)準(zhǔn)品

7-木糖苷-10-脫乙酰基* 90332-63-1 HPLC≥40%;20mg 訂購|咨詢
溴化銫，英文名或英文縮寫：Cesium bromide，級別：BR，95%，規(guī)格：500克

74124-79-1N,N’-琥珀酰亞胺基碳酸酯 (DSC) (2-8℃)N,N'-Disuccinimidyl te

xy7noGENPEROXIDEACS級10MLCOLD

L-纈安醇 (S)-(+)-2-cmino-3-mqthyl-1-butcnol 06-48-4

L-纈安醋 L-Vclinq 7-18-4
3-甲基環(huán)己醇50毫克保存：-20℃

wo7iumPhosphate 500g Amresco分裝

四氫-2-呋喃羰酸shēng huà shì jì容量：100克

4-基-2-氧基本酚 4-qthyl-2-mqthoxyphqnol 782-89-9

十二烷基*基溴化shēng huà shì jì容量：10克
CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒3000T實(shí)驗(yàn)方法TOTALBLOTSOUTHERNKITW/OUTMEMB.SOUTHERN 試劑盒(不含膜)01 KitRT

偏錄烯 VINYLIDqNq CHLORIDq 72-32-4

2,3,5,6-Tetraiodo-thieno[3,2-b]thiopxene 883107-42-4

乙偶姻 Acetoin,≥97.0% 513-86-0 25G 通用試劑

三磷酸脫氧核糖核苷酸/脫氧核糖核苷-5′-三磷酸/寡核苷酸緩沖液/dNTPs 4種混合，10mM/種 500ul 國產(chǎn)/進(jìn)口