Caspase 10 活性檢測試劑盒100T使用說明書 返回列表頁

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Caspase 10 活性檢測試劑盒100T使用說明書儲存條件：裂解緩沖液和檢測液室溫保存；其他-20℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

Caspase10活性檢測試劑盒(Caspase10ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中Caspase10酶活性或純化的Caspase10酶活性的試劑盒。Caspase家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中Caspase-10是近年來發(fā)現(xiàn)的一類含有死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域(dead-effectordomain,DED)的蛋白酶,在結(jié)構(gòu)上與Caspase家族的另一成員Caspase-8有很高的同源性，通過形成死亡誘導(dǎo)信號復(fù)合物(deathinducedsignalingcomplex,DISC)，激活自身蛋白酶活性，傳遞凋亡信號。Caspase-10的功能異常與許多疾病的發(fā)生有著密切的關(guān)系。

Caspase-10比色法檢測試劑盒提供了一種簡單方便的方法檢測能識別AEVD序列的 caspases活性。本檢測技術(shù)基于酶切標記了的底物AEVD -對硝基苯胺（pNA）之后對發(fā)光基團pNA進行光譜光量測量。pNA發(fā)射的光譜可以被分光光度計或者微量滴定板讀數(shù)器在400-405 nm出定量檢測。 本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測，可用于培養(yǎng)細胞或新鮮組織樣本的caspase-10檢測。

Caspase 10 活性檢測試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Caspase 10 活性檢測試劑盒100T使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
紫花前胡Peucedani Decursivi Radix Nodakenin 紫花前胡苷 495-31-8 C20H24O9 ≥98%

紫草速Shikonin217-89-220mg

蘇木Caesalpinia sappan 7,3',4'-Trixy7noxy-3-benzyl-2H-chromene 7,3',4'-三輕基-3-芐基-2H-本并 1111897-60-9 C16H14O4 醋酸甲地孕同(100171

檢查用聯(lián)本100327-200201常溫，避光50mg

*相關(guān)物質(zhì)A標準品42019-78-3 25mg
1015-37-5 黃霉素標準品(NA) 250mg

靈芝醋AGanodericacidA81907-6-20mg

PerforatuMone PERFORATUMONE 827319-50-6

,四溴菊酯 標準品 號： 250MG

法卡林二醇;Faldiol 55297-87-5 20mg 訂購|咨詢
丹酚酸D Salvianolic acid D 分 子 量：492.4400 編號：142998-47-8 分子式：C20H18O10 別　　名：丹參酚酸D 【基本用途】本品用于含量測定。

紫蘇 Limnophila aromatica (Lam.) Merr. L-Perillaldehyde 紫蘇全 18031-40-8 C10H14O 言酸地巴坐(100420

對照品20(S)-原人參二醇111747-200501含量測定

5-pxenylhydantoin5-本基海因標準品89-24-7 100mg5-本基海因標準品

苦木Picrasma quassioides Icariside E5 羊藿次甙E5 126176-79-2 C26H34O11 ≥95%
15-OxoEDE （100 ug）     15-oxo-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15-KEDE； 15-OxoEDE

LEI-106 （10 mg）    

Annexin V， 重組的     Annexin V， Recombinant

Lignoceroyl Ethanolamide （5 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-tetracos*； Lignoceroyl Ethanolamide

5，8，11-Eicosatriynoic Acid （10 mg）     5，8，11-eicosatriynoic acid； 5，8，11-ETI； 5，8，11-Eicosatriynoic Acid

4-     SB 202190
GPC3 (144-152)Phe-Val-Gly-Glu-Phe-Phe-Thr-Asp-Val

α-Helical CRF (12-41)Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Met-Leu-Glu-Met-Ala-Lys-Ala-Glu-Gln-Glu-Ala-Glu-Gln-Ala-Ala-Leu-Asn-Arg-Leu-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-NH2

[Nle21,Tyr32] Corticotropin Releasing Factor, ovineSer-Gln-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Nle-Thr-Lys-Ala-Asp-Gln-Leu-Ala-Gln-Gln-Ala-Tyr-Ser-Asn-Arg-Lys-Leu-Leu-Asp-Ile-Ala- NH2

Biotin-Neuromedin S (human)Biotin-Ile-Leu-Gln-Arg-Gly-Ser-Gly-Thr-Ala-Ala-Val-Asp-Phe-Thr-Lys-Lys-Asp-His-Thr-Ala-Thr-Trp-Gly-Arg-Pro-Phe-Phe-Leu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2

p60c-src Substrate I-Lys(Biotin)Tyr-Ile-Tyr-Gly-Ser-Phe-Lys(Biotin)
Caspase 10 活性檢測試劑盒100T使用說明書本磺酰錄Benzenesulfonyl chlorideCP500mL

A8056-25G3-安基-1,2,4-三唑(3-AT) 3-Ami,2,4-triazole61-82-525G0

A0903-5GAlbumin Bovine,Fraction V,Cold Alcohol Isolation 牛血清白蛋白9048-46-85g

1kb DNA Ladder250ul

Lectin, from Arachis Hypogaea (peanut)