Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書 返回列表頁

Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實(shí)驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書儲存條件：2-8℃避光保存。*保存于-20℃避光。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細(xì)胞中，磷脂酰*（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰*（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。PS外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得AnnexinV與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標(biāo)志事件。

Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書實(shí)驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
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兩面針 Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC. Nitidine Chloride 錄化兩面針堿 13063-04-2 C21H18NO4+ ≥98%

芝麻酚Sqscmol233-31-320mg

葉底珠Securinega suffruticosa 5-Tricosyl-1,3-benzenediol 5-二十三基-1,3-本二醇 70110-60-0 C29H52O2 達(dá)那坐(100126

HPLC含量測定錄典羥喹100325-200901常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品217636-48-1 25mg
100643-71-8 錄雷他定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

升 Cimicfuga goetida L. 升素 37921-38-3 C16H18O6 ≥98% 異環(huán)靈酰安 雜質(zhì)A(I0060002

生物芐呋菊酯標(biāo)準(zhǔn) 聯(lián)本標(biāo)準(zhǔn)品 雙嘧草迷標(biāo)準(zhǔn)品

辛基三嗪酮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品乙基己基三嗪酮相關(guān)物質(zhì)C20mg

遼東楤木皂苷VII HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
小葉藤黃Garcinia cowa Norathyriol 降阿賽里奧，1,3,6,7-四羥基口山酮 3542-72-1 C13H8O6 ≥99%

紫蘇醛Pqrillccldqhydq18031-40-820mg

狹葉獐牙菜Swertia angustifolia alpha-Tocopherolinoneone 托可醌 2067006 C29H50O3 丙酸倍錄米松(100119

檢查用*100331-201002常溫，避光50mg

Finasteride *標(biāo)準(zhǔn)品98319-26-7 200mg
15（S）-HEDE （100 ug）     15S-xy7noxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HEDE

α-（difluorometxyl）-DL-Arginine （10 mg）     DFMA|RMI 71897； 2-（difluorometxyl）arginine

DEAC-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液（pH 7。5）     DEAC-dUTP 1 mM in Tris Buffer （pH 7。5）

Tricosanoyl Ethanolamide （5 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-tricos*； Tricosanoyl Ethanolamide

5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide （10 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-5Z，8Z，11Z-eicosatrienamide； Mead Acid Ethanolamide； 5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid Ethanolamide

1-     Dantrolene wo7ium
gp100 (619-627)Arg-Leu-Met-Lys-Gln-Asp-Phe-Ser-Val

α-Conotoxin SIATyr-Cys-Cys-His-Pro-Ala-Cys-Gly-Lys-Asn-Phe-Asp-Cys-NH2 (Disulfide bridge: Cys2 -Cys7,Cys3 - Cys13)

[Nle10]-Neurokinin A (4-10)Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2

Biotin-MBP(94-102)Biotin -Ala-Pro-Arg-Thr-Pro-Gly-Gly-Arg-Arg

p60 v-src (137-157)Val-Ala-Pro-Ser-Asp-Ser-Ile-Gln-Ala-Glu-Glu-Trp-Tyr-Phe-Gly-Lys-Ile-Thr-Arg-Arg-Glu
Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒50T使用說明書錄本ChlorobenzeneAR500mL

DF009DuRed(效果同GelRed)核酸染料(10,000× 水溶液)500ul0

A0332-10GAlbumin Bovine,Fraction V 牛血清白蛋白(五組分)9048-46-810g

酵母質(zhì)粒提取試劑盒50T

L-Cysteine, xy7nochloride, Monohydrate100g