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    提高蛋白酶抑制劑的轉染效率的原因

    時間:2018-5-14閱讀:308
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    為了提高蛋白酶抑制劑的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到低,如Entranster-E。

    懸浮細胞不易轉染,是因為選對試劑及良好的細胞培養環境。

    懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養液中呈懸浮狀態生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。

    目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。

    其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養,易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。
    蛋白酶抑制劑不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養環境才是關鍵。

     巨噬細胞移動抑制因子IgG 人唾液酸(SA) 

     聚集蛋白IgG 人脫氧尿三磷酸(DUTP) 

     聚*/抗His tag(C端)標簽IgG 人脫氧膠原吡啶交聯(DPD)

     聚*/抗His tag標簽IgG 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)

     抗“衰老關鍵蛋白”IgG 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)

     抗“衰老關鍵蛋白”IgG 人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)

     抗6-磷酸*脫氫酶IgG 人透明質酸(HA)

     抗Ⅱ型膠原IgG 人脫氫表雄酮(DHEA)
    蛋白酶抑制劑

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