SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系） ；293T/17說明書

SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系） ；293T/17說明書：
細胞名稱 SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系） ；293T/17 
形態特性 上皮樣  
生長特性 貼壁生長 
特征特性 該細胞來源于表達SV40T抗原的293T細胞；可以產生高滴度的有感染性的逆轉錄病毒。 
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；4mM L-glutamine 
傳代方法 1:4~1:8傳代；2~3天換液1次。 
傳代情況 
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS  
支原體檢測 培養法（-）     
SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系）依據細胞株數據單之基礎培養基種類、血清種類和其它之成份和比例， 制備培養基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養基或不同之血清種類， 若因實驗需要， 必須有所不同時， 務必以緩慢比例漸次改變培養基組成， 確定細胞適應后， 方進行所需之實驗。
SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系）FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異*，請務必依據細胞株資料單之血清種類培養之。
將培養基置于 37 °C水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之， 移入無菌操作臺內。取出冷凍管， 立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿， 否則易發生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后， 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部， 移入無菌操作臺內。
依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取 10 ml培養基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養基， 混 合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養箱培養。
對絕大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數因對DMSO 敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO 者， 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養基中,離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養基，將細胞均勻混合后， 轉移至培養瓶中， 再放入37 °C， 5 % CO2 培養箱培養。
SV40T轉化的人胚腎細胞（亞系） ；293T/17處理方式為︰
1. 于寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養基。請檢查flask 外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象，若有任何問題， 不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C， 5 % CO2 培養箱中，使細胞回溫至37 °C， 并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養基，(取出之培養基可以再使用)，僅留約5-10ml 培養基于flask 內，依 一般培養方式再將細胞置入培養箱中或細胞已長滿盤， 則將細胞做傳代培養。
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V40T轉化的人胚腎細胞（亞系） ；293T/17