中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS3操作步驟 返回列表頁

中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS3操作步驟操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

細(xì)胞名稱   中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS3操作步驟
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 CHO-HCV-NS3細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS3基因，能穩(wěn)定表達(dá)NS3蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C19

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基

中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS3操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時， 是否應(yīng)馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在解凍之后， 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)， 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
長春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Vindoline 文多靈 2182-14-1 C25H32N2O6 ≥98%

柚皮苷Ncringin1036-47-20mg

參皂苷Rh1;參皂甙Rh1 Ginsenoside Rh1 63223-86-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品右旋糖酐分子量D1140638-200001分子量測定

補骨脂寧;補骨脂異黃酮 corylin 53947-92-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
洋金花Datura me 3,11,12-Trixy7noxyspirovetiv-1(10)-en-2-one 3,11,12-三羥基螺旋菌-1(10)-烯-2-酮 220328-03-0 C15H24O4 ≥95%

甘草次醋GlycyrrhqtinicccidHPLC≥98%，20mg/支

甲基原*;甲基原薯蕷皂甙 metxyl protodioscin 54522-52-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130480-200302含量測定

車葉草苷 Asperuloside 14259-45-1 20mg HPLC≥98% 車葉草苷 14259-45-1
云南含笑Michelia yunnanensis D-Pinitol D-* 10284-63-6 C7H14O6 ≥98%

東莨菪內(nèi)酯ScopolqtinHPLC≥99%;20mg/支

夾竹桃Nerium oleander Uzarigenin digitaloside 烏沙苷元 洋地黃苷 61217-80-9 C30H46O8 *(5848

含量測定*100427-200301常溫，避光50mg

Diflunisal二扶尼柳標(biāo)準(zhǔn)品22494-42-4200mg
13，14-dihydro Prostaglandin F1α （10 mg）     9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prostan-1-oic acid； PGFα|13，14-dihydro PGF1α； 13，14-dihydro Prostaglandin F1α

MMB018 （10 mg）     methyl （1-pentyl-1H-indole-3-carbonyl）-L-valinate

三羥基氨甲烷鹽酸鹽（5KG）     TRIS Hydrochloride， 1185-53-1； MW 157.8

Tetrodotoxin Citrate （1 mg）     （4R，4aR，5R，7S，9S，10S，10aR，11S，12S）-2-ami，4，4a，5，9，10-hexahydro-12-（hydroxymethyl）-5，9:7，10a-dimethanol-10aH-[1，3]dioxocino[6，5-d]pyrimidine-4，7，10，11，12-pentol， citrate； TTX； Tetrodotoxin Citrate

Prostaglandin A1 methyl ester （10 mg）     15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10，13E-dien-1-oic acid， methyl ester； PGA1 methyl ester； Prostaglandin A1 methyl ester

5，7，4’-Trihydroxyflavanone； 2，3-dihydro-5，7-dihydroxy-2-（4-hydroxyphenyl）-4H-1-benzopyran-4-one； NGEN     Naringenin
G6PDH Cofactor （1 ea）     G6PDH Cofactor

*標(biāo)記組蛋白H3多肽（69-89）     Biotinylated Histone H3 Peptide （residues 69-89） （100 ul）

Thiamet G （5 mg）     2-（ethylamino）-3aR，6S，7R，7aR-tetrahydro-5R-（hydroxymethyl）-5H-pyrano[3，2-d]thiazole-6，7-diol； Thiamet G

PLX4720 （10 mg）     Raf Kinase Inhibitor V； N-[3-[（5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl）carbonyl]-2,4-difluorophenyl]-1-propanesulfonamide

β-Glycerophosphate （sodium salt hydrate） （50 g）     2-（dihydrogen phosphate）-1，2，3-propanetriol， disodium salt， pentahydrate； β-Glycerophosphate （sodium salt hydrate）

15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard (50 mg)     15-keto PGE2, 15-keto Prostaglandin E2 Lipid Maps MS Standard, 9,15-dioxo-11α-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
中國倉鼠卵巢細(xì)胞（亞系克隆）；CHO-HCV-NS3操作步驟Ellman’s Reagent （100 dtn）     Ellman’s Reagent

1,2-O-Dihexadecyl-rac-glycerol （500 mg）     2,3-bis（hexadecyloxy）-1-propanol

yenine 3。5馬來酰亞胺 [相當(dāng)于Cy3。5馬來酰亞胺]     yenine 3。5 Maleimide [equivalent to Cy3。5 Maleimide]

Donepezil （100 mg）     2，3-dixy7no-5，6-dimetxoxy-2[[1-（pxenylmetxyl）-4-piperidinyl]metxyl]-1H-inden-1-one； Aricept ； Donepezil

5（S），6（R）-Lipoxin A4 （100 ug）     5S，6R，15S-trixy7noxy-7E，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 5（S），6（R），15（S）-TriHETE|5（S），6（R）-LXA4； 5（S），6（R）-Lipoxin A4

N6-metxyl-（R）-roscovitine； Amyloid-β Forty-Two Inducer 4     Aftin-4

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