小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A實驗方法 返回列表頁

小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

細胞名稱   小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A實驗方法
形態特性 成纖維細胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選穩轉株。 Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前生產Wnt-3A條件培養基的來源。 由于這種條件培養基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養基的實驗有必要用其來源細胞株(ATCC CRL-2648)作對照。

培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清，10%；0.4 mg/ml G-418

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

使用權限 A類

小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A實驗方法細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)ELISA試劑盒 ，英文名： AT1R ELISA Kit

人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA檢測試劑盒HumanAdenovirusAntigen,ADV-AgELISAKit 96T/48T

大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉移酶,線粒體(PGS1)免疫試劑盒 Rat PGS1 ELISA kit

CLIAKitforsE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素規格：48T/96T

*核酸-蛋白結合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒10次

ELISAKitCSF人集落刺激因子規格：48T/96T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒

HumanAnti-OvaryAntibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancholecystokinin,CCKELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒規格：96T/48T

紫外可見光分析20樣本

HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標簽)

IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)

HAVCR2重組食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白 (His 標簽)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
DLL1重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標簽) Protein

HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原

BLK重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽) Protein

LILRA3 Protein Human 重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (Fc 標簽)

ADAM15 Protein Mouse 重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標簽)
小鼠皮下結締組織細胞；L Wnt-3A實驗方法HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

信號素3B(SEMA3B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3B (SEMA3B)

PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標簽) Protein

STC1重組人 STC-1 / Stanniocalcin-1 蛋白 (His 標簽) Protein

CTSV Protein Human 重組人 Cathepsin V / Cathepsin L2 / Preproprotein 蛋白 (His 標簽)

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