人前列腺癌細胞；LNCaP clone FGC實驗方法 返回列表頁

人前列腺癌細胞；LNCaP clone FGC實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

細胞名稱   人前列腺癌細胞；LNCaP clone FGC實驗方法
形態(tài)特性 上皮細胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。 這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應。 這株細胞并不形成*的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。 它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養(yǎng)基變酸。 生長很慢。 傳代后48小時內(nèi)不應擾動。 當培養(yǎng)瓶封包后，多數(shù)細胞從培養(yǎng)瓶底分離，懸浮在培養(yǎng)基中。 收到后，在通常培養(yǎng)單層細胞的條件下培養(yǎng)24到48小時，以合細胞再貼壁。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 P(18+5)

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:10,11；D13S317:10,12；D16S539:11；D18S51:11,12；D19S433:13.2,15；D21S11:29,32.2；D2S1338:16；D3S1358:16；D5S818:11,12；D7S820:9.1,10.3；D8S1179:12,14；FGA:19,20；TH01:9；TPOX:8,9；vWA:16,18

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

人前列腺癌細胞；LNCaP clone FGC實驗方法細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

SERPINB8 Others Mouse 小鼠 SerpinB8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺二倍體細胞;HL

DT40細胞，雞淋巴瘤細胞 人小細胞肺癌細胞,NCI-H446細胞 CL-0395NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1

IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL-13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照)
PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R049大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠垂體細胞RPC

BeWo細胞，人胎盤絨膜癌細胞 新生牛眼晶體上皮細胞,NBLE細胞 人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC

IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2

786-O(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人臍動脈內(nèi)皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg
CM-R049大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠垂體細胞RPC

BeWo細胞，人胎盤絨膜癌細胞 新生牛眼晶體上皮細胞,NBLE細胞 人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC

IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2

786-O(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人臍動脈內(nèi)皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg
*,氟*  進口分裝 

天青I;天青B  進口分裝  骨成型蛋白 -9(BMP-9)

間甲基紅  進口分裝  可溶性 CD163 分子 (sCD163)

伐地那非三水合鹽酸鹽  進口分裝  整合素 b 1(CD29)
大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISAKit  進口分裝  貝母辛    A0331  19773-24-1    HPLC≥98%  10mg/支

大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit  進口分裝  *    A0332  520-27-4    HPLC≥95%  20mg/支

大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit  進口分裝  香蒲新苷    A0333  104472-68-6    HPLC≥98%  20mg/支

大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISAKit  進口分裝  哈巴俄苷    A0334  19210-12-9    HPLC≥98%  20mg/支
人前列腺癌細胞；LNCaP clone FGC實驗方法3 x Loading buffer, sequencing  進口分裝  大鼠白介素 -12 p70 (rat IL-12 p70)

膠原酶I型(sigma)  進口分裝  兔環(huán)磷酸鳥苷(rabbit cGMP)

多酚氧化酶  進口分裝  兔干擾素-a(rabbit IFN-a)

M63 Broth  進口分裝  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-3(rabbit MMP-3)

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