Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554實驗方法 返回列表頁

細胞名稱   Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554實驗方法
形態特性 上皮樣；多角形

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色體

使用權限 A類

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Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554實驗方法細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
恒河猴腎細胞;RM-1

TGFBR3 Others Human 人 TGFBR3 / Betaglycan 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

恒河猴皮膚細胞;RM-S1 人結腸癌細胞，LoVo細胞 TE-1(食管癌細胞)

人癌細胞;MCF 7B

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細胞裂解液 (陽性對照)
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H057人卵巢微血管內皮細胞*培養基100mL

人小神經膠質細胞HM

K562/Adr細胞，人白血病*耐藥株 小鼠T淋巴細胞,Cl.Ly1+2-/9細胞 前脂肪細胞分化培養基PADM

MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

ARPE-19(人視網膜上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R083大鼠滑膜細胞*培養基100mL EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405
CM-H057人卵巢微血管內皮細胞*培養基100mL

TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小神經膠質細胞HM

K562/Adr細胞，人白血病*耐藥株 小鼠T淋巴細胞,Cl.Ly1+2-/9細胞 前脂肪細胞分化培養基PADM

MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

ARPE-19(人視網膜上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R083大鼠滑膜細胞*培養基100mL EB病毒轉化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405
Inorganicbacteria  進口分裝  炔諾  Norethindrone  號：  68-22-4  質量規格：  >97%

BF839菌計數選擇培養基  進口分裝  丁溴酸東莨菪堿（標準品）  (-)scopolamine N-butyl bromide

  號：  149-64-4  質量規格：  HPLC≥98%，標準品     

酸化K氏培養基  進口分裝  棕矢車菊素（標準品）  4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone  號
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽elisa試劑盒  進口分裝  苦玄參苷IA（標準品）  PIEFELTARRAENIN A  號：  97230-47-2  質量規格：  含量測定

大鼠8異前列腺素elisa試劑盒  進口分裝  醋酸乙酯（標準品）  Ethyl acetate  號：  141-78-6  質量規格：  含量測定

大鼠6前列腺素elisa試劑盒  進口分裝  番茄堿（標準品）  Tomatidine  號：  77-59-8  質量規格：  HPLC≥98%,標準品

大鼠6前列腺素F1aelisa試劑盒  進口分裝  樟腦（標準品）  (-)-CAMPHOR  號：  464-48-2  質量規格：  含量測定
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554實驗方法50ml尖底螺口離心管(Corning)  進口分裝  L-Lysine,Monohydrochloride

Acrylamide/Bis29:130%(m/v)Solution  進口分裝  馬來酸鈉 (順丁烯二酸鈉)

BSA牛血清白蛋白  進口分裝  Methylelue,Chloride,Trihydrate

DNAMarkerII（100-1200bp）  進口分裝  N-乙酰-L-丙酸

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