Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟 返回列表頁

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟
形態(tài)特性 上皮樣；多角形

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟復(fù)蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19

TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H038人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CaEs-17, 人食管癌細(xì)胞株 癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞)

正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3

CD3D Others Human 人 CD3D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人少突膠質(zhì)細(xì)胞HO

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細(xì)胞，A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人少突膠質(zhì)細(xì)胞HO

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細(xì)胞，A-704細(xì)胞 AGS(胃腺癌細(xì)胞)

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CookedMeatMediumBase  進(jìn)口分裝  Cbz-L-蘇酸芐酯  N-Cbz-L-threonine Benzyl Ester  號：  16597-50-5  質(zhì)量規(guī)格：  0.98

天然礦泉水檢驗培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  *酯鈉鹽  Sodium cholesteryl sulfate  號：  2864-50-8  質(zhì)量規(guī)格：  >98%,BR

ThiolglycollateMedium  進(jìn)口分裝  D-色酸  D-Tryptophan  號：  153-94-6
大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *（標(biāo)準(zhǔn)品）  Difenidol Hydrochloride  號：  3254-89-5   質(zhì)量規(guī)格：  供含量測定用

大鼠抗*Ⅲ抗體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  鹽酸*  Urapidil Hydrochloride  號：  64887-14-5  質(zhì)量規(guī)格：  >99%,BR

大鼠抗*受體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  鹽酸*（標(biāo)準(zhǔn)品）  Urapidil Hydrochloride  號：  64887-14-5  質(zhì)量規(guī)格：  含量測定

大鼠抗平滑肌抗體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  鹽酸*（標(biāo)準(zhǔn)品）  Flunarizine Hydrochloride  號：  30484-77-6  質(zhì)量規(guī)格：  含量測定
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟藍(lán)蓋玻璃瓶  進(jìn)口分裝  VirusDNA-RNAIsolationKit

8道可調(diào)移液器  進(jìn)口分裝  PfuDNA聚合酶

Biohit單道可調(diào)半支滅菌移液器  進(jìn)口分裝  ApoptoticDNALadderExtractionKit

單道雷勃彩色移液器（全彩）  進(jìn)口分裝  吉姆薩染色劑