Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566實驗方法 返回列表頁

細胞名稱   Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566實驗方法
形態特性 上皮樣；多角

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS；2ug/ml Puromycin

傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,21；D13S317：10,12；D16S539：11,13；D18S51：17,17；D19S433：12,13；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,19；D5S818：10,11；D6S1043：13,13；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,8；TPOX：8,8；vWA：17,22；

同工酶

染色體

使用權限 A類

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Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566實驗方法細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
人神經束膜細胞cDNAHPC cDNA

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質形成細胞*培養基 100mL

ZA6細胞，轉S9基因倉鼠卵巢細胞 WI-38(人二倍體胚肺細胞) 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標簽)

BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H033人腸微血管內皮細胞*培養基100mL

人腦血管平滑肌細胞HBVSMC

HEL細胞，人紅白細胞白血病細胞 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化),M-1細胞 成纖維細胞培養基FM-acf

MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記)) 5×106cells/瓶×2

B16(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養基100mL EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0920
CM-H033人腸微血管內皮細胞*培養基100mL

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腦血管平滑肌細胞HBVSMC

HEL細胞，人紅白細胞白血病細胞 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化),M-1細胞 成纖維細胞培養基FM-acf

MFC-GFP(小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記)) 5×106cells/瓶×2

B16(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養基100mL EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0920
含100mlGN增菌液均質袋10個/包用于志賀氏菌前增菌培養  進口分裝  乙酸異戊酯(standard for GC,≥99.5%(GC))   Isoamyl acetate  號：  123-92-2  質量規格：  standard for GC,≥99.5%(GC)

PH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液500ml/瓶用于制備藥品樣品的稀釋液或沖洗液  進口分裝  分散藍 35(標準品)  Disperse Blue 35  號：  12222-75-2  質量規格：  分析標準品

Bis
小鼠透明質酸elisa試劑盒  進口分裝  *,維生素B5  D-Calcium Panthotenate   號：  137-08-6  質量規格：  供HPLC法含量測定用

小鼠脫氫表雄elisa試劑盒  進口分裝  *（標準品）  Terazosin HCl  號：  70024-40-7  質量規格：  含量測定

小鼠戊糖素elisa試劑盒  進口分裝  化鈉（標準品）  Sodium chloride  號：  7647-14-5  質量規格：  含量測定

小鼠細胞間粘附分子elisa試劑盒  進口分裝  力農（標準品）  Amrinone  號：  60719-84-8  質量規格：  UV法含量測定
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566實驗方法大鼠趨化因子Fractalkine  進口分裝  Eicosyl ferulate  Eicosyl ferulate  133882-79-8  C30H50O4  ≥98%

大鼠血紅素氧化酶  進口分裝  Isoelemicin  Isoelemicin  5273-85-8  C12H16O3  ≥98%

大鼠白細胞間介素 27  進口分裝  Neochlorogenic acid  Neochlorogenic acid  906-33-2  C16H18O9  ≥98%

大鼠尿微量白蛋白  進口分裝  trans-2,3,4-Trimethoxycinnamic acid  trans-2,3,4-Trimethoxycinnamic acid  33130-03-9  C12H14O5  ≥98%

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