Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570實驗方法 返回列表頁

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570實驗方法
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570實驗方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570實驗方法復蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
*過氧化物酶分析試劑盒GPX

TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM]

CBRH-7919細胞，肝癌細胞 人未分化胃癌細胞,HGC-27細胞 牛陀螺狀細胞;BT

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5

SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人細胞裂解液 (陽性對照)
AGA Others Human 人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

支氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

293001B細胞，Sars蛋白表達株 人導管癌細胞,MDA-MB-453細胞 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM-prf

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1

IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

AGA Others Human 人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 人細胞裂解液 (陽性對照)

支氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

293001B細胞，Sars蛋白表達株 人導管癌細胞,MDA-MB-453細胞 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM-prf

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1

IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照)
NAC瓊脂培養(yǎng)基  進口分裝  1,4-丁炔二醇(Standard for GC, ≥99.5% (GC))  2-Butyne-1,4-diol  號：  110-65-6  質(zhì)量規(guī)格：  Standard for GC, ≥99.5% (GC)

SCHAEDLER瓊脂  進口分裝  鄰硝基苯(standard for GC,>99.5%(GC))  o-Chloronitrobenzene  號：  88-73-3  質(zhì)量規(guī)格：  standard for GC,>99.5%(GC)

梭菌
小鼠白介素1受體拮抗劑elisa試劑盒  進口分裝  苯砜(標準品)  4,4'-Diaminodiphenylsulfone  號：  80-08-0  質(zhì)量規(guī)格：  含量測定

小鼠白細胞介素elisa試劑盒  進口分裝  *（標準品）  Dimenhydrinate  號：  523-87-5  質(zhì)量規(guī)格：  HPLC法含量測定

小鼠15脂加氧酶elisa試劑盒  進口分裝  *龍（標準品）  Prednisolone acetate  號：  52-21-1  質(zhì)量規(guī)格：  含量測定

豚鼠組胺elisa試劑盒  進口分裝  醋酸*（標準品）  xx  號：  719713  質(zhì)量規(guī)格：  含量測定
Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570實驗方法血管內(nèi)皮生長因子D  進口分裝  Arjunic acid  Arjunic acid  31298-06-3  C30H48O5  ≥98%

血管生成素-2  進口分裝  Buddlejasaponin IVb  Buddlejasaponin IVb  152580-79-5  C48H78O18  ≥98%

大鼠抗平滑肌抗體  進口分裝  Cucurbitacin S  Cucurbitacin S  60137-06-6  C30H42O6  ≥98%

大鼠6前列腺素F1a  進口分裝  Dipterocarpol  Dipterocarpol  471-69-2  C30H50O2  ≥98%

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