Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-571操作步驟 返回列表頁

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細胞名稱  Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-571操作步驟
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-571操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-571操作步驟復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
CM-H039人小腸粘膜上皮細胞*培養基100mL

TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人腦膜細胞HMC

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A 人肺癌細胞，NCI-H1755[H1755]細胞 MGC80-3(胃癌細胞)

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3

ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / TRAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H028人淋巴血管內皮細胞*培養基100mL

試劑耗材

KB人口腔表皮樣癌細胞 KB human oral epidermoid carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBSRPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL4 Protein Mouse 重組小鼠 IL4 / Interleukin-4 蛋白 (Q136D, Y139D, His 標簽)

人表皮淋巴內管皮細胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質細胞 Human
CM-H028人淋巴血管內皮細胞*培養基100mL

HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

試劑耗材

KB人口腔表皮樣癌細胞 KB human oral epidermoid carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBSRPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL4 Protein Mouse 重組小鼠 IL4 / Interleukin-4 蛋白 (Q136D, Y139D, His 標簽)

人表皮淋巴內管皮細胞(HDLEC)(5×105) 人星形膠質細胞 Human
T1N3肉湯  進口分裝  芴(標準品)  Fluorene  號：  86-73-7  質量規格：  分析標準品,≥99.5%(HPLC)

Halophilicexperimentalmedium  進口分裝  無水(無水級, 99.9%,H2O≤10ppm)  anhydrous   號：  27522  質量規格：  無水級, 99.9%,H2O≤10ppm

肝肉瓊脂培養基  進口分裝  1,3-丁二醇(標準品)   (±)-1,3-Butanediol  號：  107-88-0
小鼠α羥基丁酸脫氫酶elisa試劑盒  進口分裝  BML-275 HCl,物質C鹽酸鹽  Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C  號：  1219168-18-9  質量規格：  >98%,AMPK選擇性抑制劑

小鼠α葡萄糖苷酶elisa試劑盒  進口分裝  *（標準品）  Methimazole  號：  60-56-0  質量規格：  含量測定

小鼠α干擾素elisa試劑盒  進口分裝  枸櫞酸米芬（標準品）  Clomiphene citrate  號：  50-41-9  質量規格：  含量測定

小鼠α甘露糖苷酶elisa試劑盒  進口分裝  甲磺酸雙氫毒堿（標準品）  Dihydroergotoxine mesylate  號：  8067-24-1  質量規格：  含量測定
Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-571操作步驟前列腺素F1α  進口分裝  1-Decarboxy-3-oxo-ceanothic acid  1-Decarboxy-3-oxo-ceanothic acid  214150-74-0  C29H44O3  ≥98%

人磷酸化酪酸激酶P-JAK2  進口分裝  3-Epidehydropachymic acid  3-Epidehydropachymic acid  168293-15-0  C33H50O5  ≥98%

生存素  進口分裝  5,19-Epoxy-19R,25-dimethoxycucurbita-6,23-dien-3-ol  5,19-Epoxy-19R,25-dimethoxycucurbita-6,23-dien-3-ol  85372-72-1  C32H52O4  ≥98%

可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1  進口分裝  20(R)-Ginsenoside Rh2  20(R)-Ginsenoside Rh2  112246-15-8  C36H62O8  ≥98%