Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞；A375-Cas9-575操作步驟 返回列表頁

細胞名稱  Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞；A375-Cas9-575操作步驟
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine；400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,12；D12S391：18,21；D13S317：11,14；D16S539：9,9；D18S51：12,17；D19S433：13,14.2；D21S11：29,30；D2S1338：16,24；D3S1358：15,17；D5S818：12,12；D6S1043：11,14；D7S820：9,9；D8S1179：11,14；FGA：23,23；Penta E：10,12；TH01：8,8；TPOX：8,10；vWA：16,17；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞；A375-Cas9-575操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞；A375-Cas9-575操作步驟復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
冠狀動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B4

FO細胞，骨髓瘤細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-

LAMP3 Others Human 人 CD208 / LA
SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基100mL

主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細胞，NCI-H838[H838]細胞 BGC-823(胃腺癌細胞(低分化))

人橫紋肌肉瘤細胞;A-204

IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基100mL

SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 人肺癌細胞，NCI-H838[H838]細胞 BGC-823(胃腺癌細胞(低分化))

人橫紋肌肉瘤細胞;A-204

IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液 (陽性對照)
BCYEAgarBase  進口分裝  鉛(>98%,BR)  Lead (II) thiocyanate  號：  592-87-0  質量規格：  >98%,BR

LBAgar  進口分裝  重水,氧化氘(0.55ml*10)  Deuterium Oxide  號：  7789-20-0  質量規格：  D,99.9%

XyloseLysineDesoxycholateMedium  進口分裝  氘代(10 g )  Pyridine-D5  號：  7291-22-7
小鼠血管緊張素elisa試劑盒  進口分裝  鷹嘴豆芽素A(標準品)  Biochanin A  號：  491-80-5  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

小鼠血管活性腸肽elisa試劑盒  進口分裝  鷹嘴豆芽素A  Biochanin A  號：  491-80-5  質量規格：  >98%,BR

小鼠性激素結合球蛋白elisa試劑盒  進口分裝  柚皮苷,川陳皮素  Naringin  號：  10236-47-2  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒  進口分裝  羽扇豆醇（標準品）  Lupeol  號：  545-47-1  質量規格：  HPLC≥98%，標準品
Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞；A375-Cas9-575操作步驟可溶性淀粉合成酶(SSS）測試盒  進口分裝     英文名稱：  1,4- butyl ester  號：    分子式：  86.09  分子量：   C4H6O2

β-木糖苷酶測試盒  進口分裝   二十五酸  英文名稱：  Twenty-five acid  號：    分子式：  382.67  分子量：   CH3(CH2)23COOH

土壤β-葡萄糖苷酶（β-GC）測試盒  進口分裝   甲基叔丁基醚  英文名稱：  Methyl tert butyl   號：  1634-04-4  分子式：  88.15  分子量：   C5H12O

增殖誘導配體  進口分裝   化聚丙烯  英文名稱：  Chlorinated polypropylene  號：  68442-33-1  分子式：    分子量：

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