Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578實驗方法 返回列表頁

細胞名稱   Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578實驗方法
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長，并可懸浮生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 F12K 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:6傳代；每周2~3次換液。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；

同工酶

染色體

使用權限 A類

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Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578實驗方法細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
人細胞;Hela S3 [HeLaS3]

TMED1 Others Human 人 TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肝實質細胞*培養基 100mL

L6565細胞，小鼠白血病克隆細胞系 破傷風桿菌/梭菌Clostridium tetani 猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標簽)

PIEC(豬髖動脈內皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD10 / Ne
STATH Others Human 人 Statherin / STATH 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H020人胰島β細胞*培養基100mL

真皮淋巴上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

293sars181A細胞，Sars蛋白表達株 人細胞,HBL-100細胞 腎系膜細胞培養基MCM-prf

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2

IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H020人胰島β細胞*培養基100mL

STATH Others Human 人 Statherin / STATH 人細胞裂解液 (陽性對照)

真皮淋巴上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

293sars181A細胞，Sars蛋白表達株 人細胞,HBL-100細胞 腎系膜細胞培養基MCM-prf

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2

IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細胞裂解液 (陽性對照)
金針菇產蛋白酶支/瓶  進口分裝  苯并咪唑(>98%,BR)  Benzimidazole  號：  51-17-2  質量規格：  >98%,BR

類紅紅細菌培養基測試，腸道研究，新興傳染病研究支/瓶  進口分裝  4(5)-甲基咪唑(>98%,BR)  4(5)-Methylimidazole  號：  822-36-6  質量規格：  >98%,BR

羅斯酵母產L-蘋果酸支/瓶  進口分裝  化銨(>95%,BR)  Ammonium fluoride  號：  12125-01
人甲肟前列腺素D2elisa試劑盒  進口分裝  膠蒼術甙，羧基蒼術苷二鉀鹽(標準品)  Carboxyatractyloside  號：  33286-30-5  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人甲胎蛋白elisa試劑盒  進口分裝  *醚內酯（標準品）  Linderane  號：  13476-25-0  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人甲基化酶elisa試劑盒  進口分裝  D(十)-*(標準品)  D(+)-Glucose  號：  50-99-7  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人甲胺喋呤elisa試劑盒  進口分裝  吳茱萸次堿（標準品）  Rutaecarpine  號：  84-26-4  質量規格：  HPLC≥98%，標準品
Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578實驗方法人角蛋白10(KRT10)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   苯胺藍（水溶）  英文名稱：  Aniline blue (Shui Rong)  號：  28631-66-5  分子式：  737.72  分子量：   C32H25N3Na2O9S3

人嗅素4(OLFM4)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   甲酚紅  英文名稱：  Jia Fenhong  號：  1733-12-6  分子式：  382.42  分子量：   C21H18O5S

人血清素轉運體(SERT)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   異戊乙凈  英文名稱：  ISO e  號：  22936-75-0  分子式：  255.38  分子量：   C11H21N5S

人胰島素原(PI)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   阿尼西坦  英文名稱：  Arnie Si Staw  號：  72432-10-1  分子式：  219.24  分子量：   C12H13NO3

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