生物菌種操作時應(yīng)注意的事項

生物菌種操作時應(yīng)注意的事項
（1）劃分操作區(qū)：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現(xiàn)*閉管操作，但無論是否能夠達(dá)到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行：
① 標(biāo)本處理區(qū)，包括擴(kuò)增摸板的制備；

②PCR擴(kuò)增區(qū)，包括反應(yīng)液的配制和PCR擴(kuò)增；
③ 產(chǎn)物分析區(qū)，凝膠電泳分析，產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備。
各工作區(qū)要有一定的隔離，操作器材，要有一定的方向性。如：標(biāo)本制備→PCR擴(kuò)增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。
切記：產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個工作區(qū)。

（2）分裝試劑：PCR擴(kuò)增所需要的試劑均應(yīng)在裝有紫外燈的超凈工作臺或負(fù)壓工作臺配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中，不能用來吸取擴(kuò)增后的DNA和其他來源的DNA：
①PCR用水應(yīng)為高壓的雙蒸水；
② 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)配制；
③ 引物和dNTP應(yīng)分裝儲存，分裝時應(yīng)標(biāo)明時間，以備發(fā)生污染時查找原因。
(3) 實驗操作注意事項 盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真，在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意：
① 戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套；
② 使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長時間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染；
③ 避免反應(yīng)液飛濺，打開反應(yīng)管時為避免此種情況，開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面；
④ 操作多份樣品時，制備反應(yīng)混合液，先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好，然后分裝，這樣即可以減少操作，避免污染，又可以增加反應(yīng)的度；
⑤ *后加入反應(yīng)模板，加入后蓋緊反應(yīng)管；
⑥ 操作時設(shè)立陰陽性對照和空白對照，即可驗證PCR反應(yīng)的可靠性，又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性；
⑦ 盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器，由于加樣器*容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染，使用可替換或高壓處理的加樣器。如沒有這種特殊的加樣器，至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該，不能交叉使用，尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區(qū)；
⑧ 重復(fù)實驗，驗證結(jié)果，慎下結(jié)論。
生物菌種*Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅩ ELISA Kit

*Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅨ ELISA Kit

*Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 ，英文名： Ⅷ-Ag ELISA Kit

*Ⅷ(FⅧ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅧ ELISA Kit

*Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅦ ELISA Kit

*Ⅴ(FⅤ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅤ ELISA Kit

*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅢ ELISA Kit

*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅡ ELISA Kit

*原肽段1+2(F1+2)ELISA試劑盒 ，英文名： F1+2 ELISA Kit

*原前體蛋白(PIVKA-II)ELISA試劑盒 ，英文名： PIVKA-II ELISA Kit

*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒 ，英文名： F1+2 ELISA Kit

*原(PT)ELISA試劑盒 ，英文名： PT ELISA Kit

*血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA試劑盒 ，英文名： T-TM ELISA Kit

*受體(TR)ELISA試劑盒 ，英文名： TR ELISA Kit

*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： TSP-1 ELISA Kit

*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒 ，英文名： TAT ELISA Kit

*(TM)ELISA試劑盒 ，英文名： TM ELISA Kit

*(Thrombin)ELISA試劑盒 ，英文名： Thrombin ELISA Kit

凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 ，英文名： GS ELISA Kit

凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 ，英文名： Gelsolin ELISA Kit

凝聚素(CLU)ELISA試劑盒 ，英文名： CLU ELISA Kit

凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒 ，英文名： gelson ELISA Kit

尿腫瘤壞死因子相關(guān)誘導(dǎo)凋亡配體死亡受體4(TRAIL-DR4)ELISA試劑盒 ，英文名： TRAIL-DR4 ELISA Kit

尿游離*(UFC)ELISA試劑盒 ，英文名： UFC ELISA Kit

尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： MAU/ALB ELISA Kit

尿微量白蛋白(MAU)ELISA試劑盒 ，英文名： MAU ELISA Kit

尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 ，英文名： UreC ELISA Kit

*核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒 ，英文名： UPP1 ELISA Kit

*型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒 ，英文名： uPA ELISA Kit

*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 ，英文名： PLAUR/uPAR ELISA Kit
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