SURE 感受態細胞 100ul*50-生命科學儀器 返回列表頁

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研

培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

 SDF-1β/CXCL12 人基質細胞衍生因子1β 規格： 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 人基質細胞衍生因子1a 規格： 48T/96T

 ST3 人基質裂解素 規格： 48T/96T

 ST2 人基質裂解素 規格： 48T/96T

 ST1 人基質裂解素 規格： 48T/96T

 MAT 人基質裂解蛋白 規格： 48T/96T

 TIMP-1 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1 規格： 48T/96T

 TIMP-4 人基質金屬蛋白酶抑制因子4 規格： 48T/96T

 TIMP-3 人基質金屬蛋白酶抑制因子3 規格： 48T/96T

 TIMP-2 人基質金屬蛋白酶抑制因子2 規格： 48T/96T

 TIMP-1 人基質金屬蛋白酶抑制因子1 規格： 48T/96T

 MMP-9/Gelatinase B 人基質金屬蛋白酶9/明膠酶B 規格： 48T/96T

 MMP-8 人基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶 規格： 48T/96T

 MMP-7 人基質金屬蛋白酶7 規格： 48T/96T

 MMP-5 人基質金屬蛋白酶5 規格： 48T/96T

 MMP-4 人基質金屬蛋白酶4 規格： 48T/96T

 MMP-3 人基質金屬蛋白酶3 規格： 48T/9

雙羥甲基丙二酸二乙酯 20605-01-0

甲基三苯基碘化 2065-66-9

2-溴丙二醛 2065-75-0

2,4,5-*基惡唑 20662-84-4

氧化銀 20667-12-3

4-溴吡唑 2075-45-8

SURE 感受態細胞 100ul*504-硝基吡唑 2075-46-9

氯化銠(三水) 20765-98-4

2-溴-2-甲基丙酰溴 20769-85-1

2-氨基-4-溴苯甲酸 20776-50-5

4-溴吲哚滿二酮 20780-72-7

2,4-二甲氧基苯甲20781-20-8

L-叔* 20859-02-3

5-氨基-1,3-二氫吲哚-2-酮 20876-36-2

2-氰基-3-甲基吡啶 20970-75-6

6T

 MMP-2 人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A 規格： 48T/96T

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。