Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574 返回列表頁

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè)，主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù)，公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù)，其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫，以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A375細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine；400ug/ml G418
傳代方法  1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,12；D12S391：18,21；D13S317：11,11；D16S539：9,9；D18S51：12,17；D19S433：13,14.2；D21S11：29,30；D2S1338：16,24；D3S1358：15,17；D5S818：12,12；D6S1043：11,14；D7S820：9,9；D8S1179：11,14；FGA：23,23；Penta E：10,12；TH01：8,8；TPOX：8,10；vWA：16,17；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574處理方法
1、用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的）培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基，若出現(xiàn)渾濁情況，請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察，如有污染，請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作，拆下封口膜，如果細(xì)胞的量較少，可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠，可進(jìn)行離心收集細(xì)胞，用1×PBS洗兩遍，加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃，5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象，建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài)，可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。解凍后，用75%酒精將凍存管擦拭干凈，用吸管吸出細(xì)胞懸液，放入培養(yǎng)瓶中，再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液，放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)：
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少， 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性 損傷， 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳， 常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？
冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。羥*(Hyp)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Hydroxyproline (Hyp)48T/96T
肝癌源性生長因子(HDGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)48T/96T
肝癌源性生長因子(HDGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)48T/96T
肝癌源性生長因子(HDGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)48T/96T
中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)48T/96T
胱天蛋白酶9(P9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Caspase 9 (P9)48T/96T
BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for BH3 Ieracting Domain Death Agonist (Bid)48T/96T
BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for BH3 Ieracting Domain Death Agonist (Bid)48T/96T
BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for BH3 Ieracting Domain Death Agonist (Bid)48T/96T
胱天蛋白酶5(P5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Caspase 5 (P5)48T/96T
趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)48T/96T
趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)48T/96T
趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α4(IFNα4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)48T/96T
糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α4(IFNα4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Glycogen Syhase Kinase 3 Alpha (GSK3a)48T/96T
糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α2(IFNα2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Glycogen Syhase Kinase 3 Alpha (GSK3a)48T/96T
糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α21(IFNα21)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Glycogen Syhase Kinase 3 Alpha (GSK3a)48T/96T
B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α17(IFNα17)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Oryctolagus cuniculus (Rabbit)ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2)48T/96T
丙酮酸脫氫酶α(PDHα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α17(IFNα17)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)48T/96T
丙酮酸脫氫酶α(PDHα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α16(IFNα16)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)48T/96T
己糖激酶1(HK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α14(IFNα14)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)48T/96T
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574己糖激酶1(HK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)48T/96T
己糖激酶1(HK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)48T/96T
Ⅳ型膠原(COL4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α13(IFNα13)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4)48T/96T
中期因子(MK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)干擾素α10(IFNα10)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Midkine