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    怎樣避免人elisa免疫檢測試劑盒實驗中的過失?

    時間:2017/10/10閱讀:166
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    人elisa免疫檢測試劑盒操作步驟多,新手操作難免會有過失。而這些過失很多是由細節不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實驗時少說話,防止唾液掉進酶標條中。當然,大家還要學會自己發掘問題,找出原因。那么我們要怎樣完善ELISA試劑盒實驗中的過失? 
       
        ①:評估試劑的實用性,試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
        ②:操作前仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進,比如洗板次數的掌握等。
        ③:加樣要準確、快速。加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。另外,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
      
        ④:檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
        ⑤:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
        ⑥:嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
        ⑦:人elisa免疫檢測試劑盒洗滌*,洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。另外,洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
        ⑧:嚴控反應時間,反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
    250    PYG Broth Base    用于雙歧桿菌增菌培養,使用時需加入氯化血紅素和*1(GB標準)    PYG 液體培養基基礎
    250    Trypticase Soy-Yeast Extract Broth    用于單增李氏菌增菌培養(SN、GB標準)    胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)   
    10mg/支*5        每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準)    萘啶酮酸
    4.5mg*5        添加于225ml HB4160中制成LB1    
    4.0mg*5        添加于225ml HB4160中制成LB1    
    3.75mg/支*5        每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準)    吖啶黃素
    2.7mg*5        添加于225ml HB4160中制成LB1    
    5mg*5        添加于200ml HB4160中制成LB2    
    250    Trypticase Soy-Yeast Extract Agar    用于單增李氏菌的分純,培養,可用于做7%羊血瓊脂(SN標準)    胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)   
    250    Modified Mcbride Agar Base    用于單增李氏菌選擇性分離(SN標準)    李氏菌選擇性培養基基礎(MMA)  
    3mg/支*5        每支添加于 100ml HB4155    * 
    250    Bromcresol Purple Broth Base    適用于微生物檢驗中各種糖發酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(SN標準)    糖發酵基礎肉湯   
    250    Listeria Enrichment Broth Base    添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為LB1,LB2,用于李氏菌二步增菌(GB標準)    李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎    
    人elisa免疫檢測試劑盒

     

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