ATCC細(xì)胞貼壁速度慢

根據(jù)ATCC細(xì)胞比成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基貼壁速度慢的特點，并結(jié)合使用不加血清的營養(yǎng)液，把含有兩類細(xì)胞的細(xì)胞懸液反復(fù)貼壁，使兩類細(xì)胞相互分離，操作方法與傳代相同。
細(xì)胞離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境中，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此，培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。

（1）待細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后，倒出舊培養(yǎng)液，用*消化后，Hanks 沖洗2次，加入不含血清的培養(yǎng)液，吹打制成細(xì)胞懸液；

（2）取編號為此A、B、C三個培養(yǎng)瓶；首先把懸液接種入A培養(yǎng)瓶中。置溫箱中靜止培養(yǎng)5～20分鐘后，輕輕傾斜培養(yǎng)瓶，讓液體集中瓶角后慢慢吸出全部培養(yǎng)液，再接種入B培養(yǎng)瓶中后；向A瓶中補充少許*培養(yǎng)液置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)；

（3）培養(yǎng)B瓶中細(xì)胞5～20分鐘后，接處理A的方法，把培養(yǎng)液注入C培養(yǎng)瓶中；再向B瓶中補加*培養(yǎng)基。

當(dāng)三個瓶內(nèi)都含有ATCC細(xì)胞培養(yǎng)液后，均在溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如操作成功，次日觀察可見A瓶主要為成纖維細(xì)胞，B瓶兩類細(xì)胞相雜，C瓶可能主要為癌細(xì)胞。必要時可反復(fù)處理多次，直至癌細(xì)胞純化為止。
對照品    α-對羥基苯*    30mg    對照品
對照品    *二醇物    50mg    對照品
對照品    *    200mg    對照品
標(biāo)準(zhǔn)試劑    乙酰苯胺    200    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    *酶    2ml    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    咪唑試劑    100g    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    對乙酰氨基苯甲醚    200mg    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    庚烷磺酸鈉    5g    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    3-乙氧基-4-羥基苯甲醛    100mg    標(biāo)準(zhǔn)試劑
標(biāo)準(zhǔn)試劑    2-苯乙酰胺    65mg    標(biāo)準(zhǔn)試劑
ATCC細(xì)胞