腫瘤細胞計數(shù)板正確使用方法

不同的腫瘤細胞培養(yǎng)密度不同，想知道細胞密度，就要在細胞培養(yǎng)之前進行細胞計數(shù)，下面為大家詳情解說一下細胞計數(shù)板正確使用方法：

1．視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。 

2．取潔凈的細胞計數(shù)板一塊，在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。 

3．靜置片刻，使細胞沉降到計數(shù)板上，不再隨液體漂移。將細胞計數(shù)板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩(wěn)，先在低倍鏡下找到計數(shù)區(qū)后，再轉換高倍鏡觀察并計數(shù)。由于生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。

4．計數(shù)時若計數(shù)區(qū)是由16個大方格組成，按對角線方位，數(shù)左上、左下、右上、右下的4個大方格（即100小格）的菌數(shù)。如果是25個大方格組成的計數(shù)區(qū)，除數(shù)上述四個大方格外，還需數(shù)*1個大方格的菌數(shù)（即80個小格）。為了保證計數(shù)的準確性，避免重復計數(shù)和漏記，在計數(shù)時，對沉降在格線上的細胞的統(tǒng)計應有統(tǒng)一的規(guī)定。如菌體位于大方格的雙線上，計數(shù)時則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。即位于本格上線和左線上的細胞計入本格，本格的下線和右線上的細胞按規(guī)定計入相應的格中。見下圖：即本格中計數(shù)細胞為3個。

5．對于出芽的酵母菌，芽體達到母腫瘤細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數(shù)2-3次（每次數(shù)值不應相差過大，否則應重新操作），按公式計算出每mL（g）菌懸液所含細胞數(shù)量。 

6．測數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將細胞計數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內保存。
100277-200702    2-8℃，避光    含量測定    大豆油       200mg
100278-200402    常溫，避光    含量測定    對羥基苯甲酸甲酯    50mg
100279-200502    常溫，避光    含量測定    *    100mg
100280-201002    常溫，避光    含量測定    *    100mg
腫瘤細胞