1301：人急性T淋巴細胞使用說明書

1301：人急性T淋巴細胞使用說明書：
     【細胞縮寫】    1301細胞
    【細胞名稱】    1301(人急性T淋巴細胞)
    【背景資料】    見細胞說明書
    【細胞消化時注意把握消化時間，消化不夠會導致吹打細胞時造成損傷，一般消化時間是2-3分鐘，但以鏡檢時大部分細胞縮回球形為準，一般2次即可將細胞吹打下來，消化不夠進行細胞吹打易損傷細胞。細胞系的凍存液配方：90%FBS+10%DMSO，貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養】    細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外大學建系
    【代次】    P4
    【規格】    復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
    【細胞數】    1*10（6）
    【生物安全級別】    1
    【生物體】    人
    【組織來源】    器官：外周血；疾病：急性成淋巴細胞性白血?。粌绕?br />    【細胞形態】    T淋巴細胞
    【細胞特性】    懸浮
    【特別注意：1301：人急性T淋巴細胞如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養，貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養箱孵育到第二天再做消化傳代，請優先選擇直徑6cm的培養皿進行傳代培養，如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續脫落死亡，請及時實驗室技術人員會跟進解決】    
細胞接收后的操作流程與注意事項：
1、如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續脫落死亡，請及時實驗室技術人員會跟進解決
2、貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮*消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養
3、生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮1301：人急性T淋巴細胞進行培養
細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1、吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，1301：人急性T淋巴細胞加2-3ml 0.25%*進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）
2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ?，加6-8ml*培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3、取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養
4、注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）
1、收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清，（原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時）
2、貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養箱孵育到第二天再做消化傳代，請優先選擇直徑6cm的培養皿進行傳代培養
3、如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室。
Mouse Anti-influenza B virus nucleoprotein Monoclonal      規格:    規格：     0.1ml    產品名稱:    鼠抗人禽流感B核蛋白單克隆抗體
Anti-IFABP      規格:    規格：     0.2ml    產品名稱:    小腸型脂肪酸結合蛋白抗體
Anti-IFITM1       規格:    規格：     0.2ml    產品名稱:    干擾素誘導跨膜蛋白1抗體
Anti-IFN-β Anti-human      規格:    規格：     0.1ml    產品名稱:    干擾素-β抗體
Anti-IFN-γ     規格:    規格：     0.1ml    產品名稱:    鼠抗人干擾素-γ/IFN-gamma單克隆抗體
1301：人急性T淋巴細胞