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    干細(xì)胞保藏材料及方法

    時(shí)間:2018/1/25閱讀:245
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    干細(xì)胞保藏材料有以下幾種:

    1. 明膠片

    為建立一種保存菌種時(shí)間長(zhǎng)、使用 方便,便于基層推廣應(yīng)用的菌種保藏方法.采用明膠片干燥保藏法觀察了1979-1988年分 離到的沙門菌和志賀菌118株菌種保藏效果 。 采用明膠片菌種保藏法保存了標(biāo)準(zhǔn)菌種ATCC26003*和ATCC27853綠膿桿菌.2005-2009連續(xù)5年,通過每年的傳代鑒定,菌種的存活率100.0%且各項(xiàng)生化特性保存完好未發(fā)生變異或丟失。保藏者認(rèn)為該方法保存菌種時(shí)間長(zhǎng)、使用方便又不需要昂貴的儀器設(shè)備,是一種特別適用于基層推廣應(yīng)用的菌種保藏方法 。

    2. 濾紙片

    濾紙片法低溫冷凍保存菌種的方法 研究鄧曉麗體會(huì)到在微生物檢驗(yàn)工作中菌種的保存是一項(xiàng)重要工作,對(duì)于菌株的分析研究,傳染性疾病的朔源追蹤,藥物的抑菌試驗(yàn)等都有著重要意義。她根據(jù)工作條件采用干燥濾紙片低溫冷凍保 存菌種的方法,分別將保存半年、 1年、2年的菌株進(jìn)行復(fù)蘇鑒定,認(rèn)為保藏效果良好 。實(shí)驗(yàn)室保存菌種的方法很多,有些方法簡(jiǎn)單易行, 不需要特殊設(shè)備,但經(jīng)常移植菌種易發(fā)生變異或污染雜菌,又增加工作強(qiáng)度;有些需要冷凍干燥機(jī)、 真空泵,全自動(dòng)化生物分析儀等特殊設(shè)備。她們采用干燥濾紙片低溫冷凍保存菌種, 2年后將菌種復(fù)蘇進(jìn)行鑒定,取得理想效果 。

    3. 牛乳

    一種簡(jiǎn)便、實(shí)用、 并能較長(zhǎng)期保存菌種方法,更好地為教學(xué)、科 研提供標(biāo)準(zhǔn)菌株。將復(fù)蘇的29種細(xì)菌菌種,接種于經(jīng)鑒定無污染者的無菌新鮮牛乳中,置普通冰箱冷凍室-20℃低溫保存,并定期復(fù)蘇進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示所有菌種一次接種可保存3年以上,通過對(duì)細(xì)菌存活情況、形態(tài)、染色、生化特性及血清學(xué)試驗(yàn)觀察和鑒定等與初始鑒定結(jié)果一致。新鮮牛乳保存菌種法保存菌種效果可靠,而且不須反復(fù)傳代,不需特殊設(shè)備,是一種操作簡(jiǎn) 便、易于推廣的保存菌種新方法 。

    分別采用斜面低溫法、半固體穿刺法、液體石蠟法、脫脂牛奶低溫凍存法、冷凍干燥保存法進(jìn)行研究,考察各方法保存后菌的存活時(shí)間和存活率。結(jié)果用斜面低溫法、半固體穿刺法保藏6個(gè)月時(shí)菌種存活率在80%以上,但隨后菌種迅速死亡存活率降低至0;液體石蠟法可保藏9~12個(gè)月.用脫脂牛奶低溫凍存法保藏的菌種在2年后存活率仍達(dá)97.9%,且菌種的形態(tài)、生理特征基本未變。

    干細(xì)胞冷凍干燥保存2年后存活率100.0%。試驗(yàn)結(jié)果顯示脫脂牛奶低溫凍存法優(yōu)于斜面低溫法、半固體穿刺法等常規(guī)菌種保存法,保存2年后菌株存活率與凍干法比較無顯著差異,且比凍干法操作簡(jiǎn)便,更容易開展 。
     β-抑制蛋白1IgG    小鼠抗甲狀腺過氧化物酶(TPO-Ab) 
     β-抑制蛋白2IgG    小鼠抗肌內(nèi)膜IgA(EMA IgA)
     γ1氨基丁酸受體β1IgG    小鼠抗紅(RBC) 
     γ1氨基丁酸受體β1IgG    小鼠抗核膜糖蛋白210(gp210) 
     γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子IgG    小鼠抗核(ANA) 
     γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16IgG    小鼠抗單鏈DNA/變性DNA(ssDNA) 
     γ-連環(huán)蛋白(γ-γ鏈接素)IgG    小鼠抗單鏈DNA/變性DNA(ssDNA) 
     λ輕鏈IgG    小鼠抗單核(AMA)
     阿片樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白IgG    小鼠抗促甲狀腺素受體(TRAb)
    干細(xì)胞

     

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