干細(xì)胞培養(yǎng)之“收到細(xì)胞的處理方式”

冷凍干細(xì)胞解凍程序:
2.1.依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。
2.2.FBS(fetalbovineserum,胚牛血清),CS(calfserum,小牛血清)和HS(horseserum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。
2.3.將潔特培養(yǎng)基置于37C水槽中回溫，回溫后噴以70%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出潔特冷凍管，立即放入37C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖潔特冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。
2.4.依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T25或T75JET培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入37C，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
2.5.對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml潔特培養(yǎng)基中，離心300xg(約1000rpm)，5分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮的潔特培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至潔特培養(yǎng)瓶中，再放入37°C，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
No.2
收到T25JET培養(yǎng)瓶培養(yǎng)出的細(xì)胞時(shí)，處理方式為︰
1.于寄送過(guò)程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T25flask均加滿潔特培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查培養(yǎng)瓶的外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象，若有任何問(wèn)題，不要打開(kāi)蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。
　2.將原封之T25JET培養(yǎng)瓶靜置于37°C，5%CO2培養(yǎng)箱中，使干細(xì)胞回溫至37°C，并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后，于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出JET培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)之培養(yǎng)基，(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約5-10ml培養(yǎng)基于JET培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán)，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
121-33-5     1g        香蘭素熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品    
121-33-5     200mg    Vanillin     香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品    
121412-77-9    200mg    Cefprozil (Z)-Isomer    *（Z）-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品    
121-54-0    500mg    Benzethonium Chloride    芐索氯銨標(biāo)準(zhǔn)品    
121-57-3     200mg    Sulfanilic Acid     對(duì)氨基苯磺酸標(biāo)準(zhǔn)品    
121-59-5    200mg    Carbarsone    卡巴胂標(biāo)準(zhǔn)品    
121-66-4     25mg        硝唑尼特相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    
12167-74-7    1g        磷酸三鈣標(biāo)準(zhǔn)品    
干細(xì)胞