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ELISA試劑盒競爭抑制方法的建立

閱讀：219發(fā)布時間：2018-4-2

ELISA試劑盒試驗采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標記在抗體上，標記完后取上清用Sephedex G200凝膠層析進行純化，洗脫液為0.2mol/LpH7.4的PBS，流速為15mELISA試劑盒l(wèi)/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度計測A280吸光度值，以洗脫體積為橫坐標，吸光值為縱坐標做圖，ELISA試劑盒收集*峰即為酶標抗體峰。
ELISA試劑盒標記完后用紫外分光光度計在分別在280nm、及403nm處測定酶標記物的A值，計算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結(jié)合率以及標記率。包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優(yōu)化包被緩沖液的優(yōu)化
包被抗原時，為了得到的包被效果，我們采用了碳酸鹽緩沖液（50mM ph9.6 ）、磷酸鹽緩沖液（50mMph7.6）、以及TRIS鹽酸緩沖液（50 mM ph7.6）三種緩沖液作為包被液，抗原包被濃度為5ug/ml，及2.5ug/ml,酶標抗體工作濃度為1：400及1：300，ELISA試劑盒用自動酶標儀小鼠ELISA試劑盒分析，選擇的包被緩沖液系統(tǒng)。同時為了保證緩沖液能夠*保存，在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。

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