1．破壞
ELISA試劑盒一般用磨粉機(jī)、糧谷破壞機(jī)、絞肉機(jī)等將塊狀的或顆粒較大的動(dòng)植物樣本細(xì)化的進(jìn)程。意圖是增大樣本表面積，有利于待測(cè)組分的提取。
2．提取
提取是使待測(cè)組分與樣品別離的進(jìn)程。
ELISA試劑盒提取的辦法較多，有靜置法、勻漿法、振動(dòng)提取法、設(shè)備提取法等。現(xiàn)將常用的提取辦法扼要介紹如下：
(1) 安排搗碎法是食物檢測(cè)中zui常用的一種提取辦法，將經(jīng)破壞的樣品與等量或數(shù)倍于其體積的溶劑混合，經(jīng)過(guò)高速旋轉(zhuǎn)的葉片(100r／min)將樣本中的待測(cè)組分與溶劑有充沛的觸摸機(jī)會(huì)，使待測(cè)組分被提取出來(lái)。該辦法提取功率高。使用的首要設(shè)備有高速安排搗碎機(jī)、安排勻漿機(jī)、高速均質(zhì)器等。在農(nóng)藥殘留量剖析中簡(jiǎn)直都選用安排搗碎法提取，每次提取的時(shí)刻約為3～5min，次數(shù)1～2次。在本操作進(jìn)程中，需求留意以下事項(xiàng)：試樣和溶劑的總體積不應(yīng)該超過(guò)搗碎缽容積的2／3，避免內(nèi)容物濺起；搗碎機(jī)的旋轉(zhuǎn)速度，一般是先慢后快；整個(gè)操作要在通風(fēng)杰出的環(huán)境下進(jìn)行。
(2) 索氏提取法也是食物檢測(cè)中zui常用的提取辦法之一。此法經(jīng)過(guò)設(shè)備——索氏提取器提取待測(cè)組分，提取功率高，操作簡(jiǎn)潔，但提取時(shí)刻長(zhǎng)。選用索氏提取法時(shí)，應(yīng)充沛考慮待測(cè)組分的熱穩(wěn)定性。
(3) 振動(dòng)法在食物檢測(cè)中也較為常用。行將裝有試樣和提取溶劑的具塞容器，放在振動(dòng)機(jī)上，進(jìn)行往復(fù)振動(dòng)或旋轉(zhuǎn)振動(dòng)，使容器內(nèi)的提取溶劑與試樣充沛觸摸，以深化到樣本安排內(nèi)部提取待測(cè)組分。一般情況下，振動(dòng)10-30min，重復(fù)提取2～3次。據(jù)報(bào)道，振動(dòng)法與安排搗碎法和索氏提取法的提取功率適當(dāng)。日本的食物剖析辦法中簡(jiǎn)直都選用振動(dòng)法。
(4) 超臨界流體萃取儀、強(qiáng)化溶劑萃取儀是近二十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的提取技能。別的還有一些輔佐手段，如超聲波輔佐提取、微波輔佐提取等。
3．凈化
經(jīng)過(guò)提取的待測(cè)組分，提取物中一般含有與該組分結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì)，將待測(cè)組分與雜質(zhì)別離的進(jìn)程，稱為凈化。
該進(jìn)程是樣本前處理的技能難點(diǎn)，也是關(guān)系到檢測(cè)成果的真實(shí)性及檢測(cè)辦法可靠性的重要進(jìn)程。首要辦法有固相萃取法、液-液分配法、化學(xué)處理法、掃集共蒸餾法、低溫冷凍凈化法、前置色譜柱凈化法等。
固相萃取法是現(xiàn)在應(yīng)用zui多的凈化辦法之一，經(jīng)過(guò)吸附柱、分配柱、凝膠浸透柱、薄層板等完成，其原理是樣本的待測(cè)組分在層析柱中吸附劑上被吸附與被解吸的反復(fù)進(jìn)程。常用的吸附劑有佛羅里硅土、氧化鋁、活性炭、硅膠、氧化鎂和纖維素等。
液-液分配法也是一種非常常用的凈化辦法，其原理是使用待測(cè)組分在一組互不相溶的溶劑對(duì)內(nèi)的分配系數(shù)不同，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次分配，使待測(cè)組分與雜質(zhì)別離，以到達(dá)凈化意圖。常用的溶劑對(duì)有乙腈提取液的正已烷分配、乙腈提取液的分配、丙酮提取液的石油醚分配、丙酮提取液的二氯甲烷分配等。
4．濃縮
ELISA試劑盒因?yàn)閮艋M(jìn)程所引進(jìn)的溶劑，可能會(huì)下降待測(cè)組分的濃度或不適宜直接進(jìn)樣，需求去除部分或全部溶劑及進(jìn)行溶劑變換，此進(jìn)程為濃縮或富集。首要經(jīng)過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干或惰性氣體(如氮?dú)?吹干除掉溶劑。
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