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ELISA試劑盒酶結合物的制備

閱讀：119發布時間：2017-8-15

ELISA試劑盒酶符號抗體方法主要有兩種：戊二醛交聯法和過碘酸鹽氧化法。
1、戊二醛交聯法
戊二醛是一種雙功用團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基經過它而聯接。堿性磷酸一般用此法進行符號。交聯方法分一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接參加酶與抗體的混合物中，反應后既得酶符號抗體。
ELISA試劑盒中常用的酶一般都用此法交聯。它具有操作簡潔、有用（結合率達60%~70%）和重復性好等長處。缺陷是交聯反應是隨機的，酶與抗體交聯時分子間的份額不嚴厲，結合物的巨細也不均一，酶與酶，抗體與抗體之間也有可能交聯，影響效果。在兩步法中，先將酶與戊二醛效果，透析除掉剩余的戊二醛后，再與抗體效果而構成酶標抗體。也可先將抗體與戊二醛效果，再與酶聯合。
2、過碘酸鹽氧化法
ELISA試劑盒本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的符號常用此法。反應時，過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑，可與蛋白質上的氨基構成Schiff氏堿而結合。

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