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    技術(shù)文章

    ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu)修正

    閱讀:149發(fā)布時間:2017-11-28

    1. 加規(guī)范品:在酶標包被板上設(shè)規(guī)范品孔,順次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
    2. 加樣:ELISA試劑盒別離設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
    6. 加酶:
    ELISA試劑盒除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
    7. 溫育:操作同3。

    8. 洗滌:操作同5。
    9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,ELISA試劑盒再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
    11. 測定:
    ELISA試劑盒以空白空調(diào)零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進行。


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