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    ELISA試劑盒選擇優(yōu)化的包被條件方法

    閱讀:178發(fā)布時(shí)間:2018-2-27

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    ELISA試劑盒選擇優(yōu)化的包被條件方法:
    1)包被抗原的選擇:包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類,天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被。
    2)包被液的選擇:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
    3)包被溫度的選擇:通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時(shí),強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。
    4)包被濃度的選擇:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對(duì)特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定。

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