在進(jìn)口原裝elisa試劑盒方法技術(shù)中，首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因為酶標(biāo)記物濃度的很小的一個變化，便會導(dǎo)致整個試驗結(jié)果產(chǎn)生很大的波動。另外，由于濃度過高，會使非特異性反應(yīng)增加，而濃度過低又會影響測定的敏感性。因此，在正式準(zhǔn)備試驗前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度，才能完善整個實驗。
1. 酶標(biāo)記抗體的滴定方法是：將抗原（或抗體）物理吸附于固相載體上，然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標(biāo)抗體（或抗Ig抗體）與吸附在載體上的抗原（或抗體）起反應(yīng)，以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來確定酶標(biāo)記抗體的效價，或稱工作濃度。
2. 其步驟為：先將抗原（或抗體）用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為10μg/ml左右，于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.1ml，4℃一夜，次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標(biāo)記抗體用1%BSA-PBS液依次稀釋成1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600（根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定），分別加入反應(yīng)孔中，每個稀釋度二孔，每孔0.1ml，37℃孵育1小時后洗滌。然后加底物液，每孔0.1ml，37℃10～30分鐘。以2M H２SO4 0.05ml終止反應(yīng)。
3. 結(jié)果判定主要是以進(jìn)口原裝elisa試劑盒比色儀（酶標(biāo)儀）讀取各孔的OD值，并以O(shè)D為縱座標(biāo)，結(jié)合物濃度為橫座標(biāo)，繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為1.0左右，且曲線斜率zui大時的酶標(biāo)抗體稀釋度，即為該標(biāo)記物的工作濃度。
Benzoyloxypeoniflorin 苯甲酰氧化芍藥苷 20mg 72896-40-3
Benzoylmesaconine 苯甲酰新烏頭原堿 20mg 63238-67-5
Benzoylaconine 苯甲酰烏頭原堿 10mg 466-24-0
Benzoylpaeoniflorin 苯甲酰芍藥苷 20mg 38642-49-8
Benzoylhypacoitine 苯甲酰次烏頭原堿 20mg 63238-66-4
Benzoic acid 苯甲酸 20mg 65-85-0
Peimisine 貝母辛 10mg 19773-24-1
Peiminine 貝母素乙 20mg 18059-10-4
Peimine 貝母素甲 20mg 23496-41-5
進(jìn)口原裝elisa試劑盒
