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    技術文章

    白介素elisa試劑盒實驗中問題分析

    閱讀:345發布時間:2017-6-13

    1.白介素elisa試劑盒孵育反應時間不足
    定時鐘準確定時
    2.洗滌時沖擊力太大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數增加
    減少洗滌沖擊力,按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數
    3.顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入
    滴加顯色液時,滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,反加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入
    4.顯色劑反應時間不足
    準確定時
    5.蒸餾水水質有問題
    測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響
    6.試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高
    白介素elisa試劑盒置保溫箱內運輸,并放足夠數量的冰塊,盡量縮短運輸時間
    7.試劑、樣品用前未能平衡
    用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右。
    8.樣品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反應
    樣品不能加 NaN 3 防腐
    9.試劑盒超過有效期
    超過效期試劑盒不要使用
    10.試劑開啟時間過長長菌
    試劑開啟后請盡量在短時間內用完
    11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內壁掛液太多或內壁不清潔
     校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快,排放應*。吸頭內壁要清潔,一次性使用。
    12.恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃)放入反應板時注意培養箱溫度,及時調整,孵育反應期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。
    ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。
    不同批次的白介素elisa試劑盒在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。


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