大鼠白介素1（IL-1）ELISA檢測試劑盒 返回列表頁

操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。

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試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

人參皂苷Re;Ginseside R 52286-59-6 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

芹菜苷;Apiin 26544-34-3 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

去氫二異丁香酚;Dehydrodiiso 2680-81-1 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

泊金異丙酯;Isopropyl 4-H 4191-73-5 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

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獨(dú)活素;Heraclenin 2880-49-1 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

大鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞SCaBER(人膀胱鱗細(xì)胞)

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer桿菌屬 Lactobacillus sp.

貝葉多孔菌根瘤菌

丹參酮IIAU-2 OS, 人骨瘤細(xì)胞

大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基日本根霉 Rhizopus japonicus

異常漢遜酵母 Hansenula anomala磚紅鐮孢

涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis畢赤酵母 Pichia sp.

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)Hep 3B(人肝細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum酸球菌 Lactococcus lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti苜蓿中華根瘤菌

Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

水螺菌 Aquaspirillum sp.戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

少根根霉 Rhizopus arrhizus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae293(人胚腎細(xì)胞)

海水產(chǎn)堿菌泡盛曲霉 Aspergillus awamori